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神经干细胞与脑肿瘤干细胞体外培养的生长特性比较 中文摘要 神经干细胞与脑肿瘤干细胞体外培养的生长特性比较 中文摘要 【目的】探索人胚神经干细胞及胶质瘤肿瘤干细胞体外分离培养的 条件，并观察比较其在体外分离培养的生长特性。用CDl33免疫磁珠分 选阳性细胞后为进一步研究提供材料。 【方法】神经于细胞：取米非司酮流产8．12周胎龄的人胚胎，从胎 脑皮层分离组织，采用胰蛋白酶消化和机械吹打的方法获得单细胞悬液。 子和N：添加剂刺激细胞增殖，从而进行体外扩增培养、连续传代。添加 10％胎牛血清诱导分化，免疫细胞化学鉴定神经干细胞(Nestin)和分化 胶质瘤肿瘤干细胞：将SHG44细胞系和人脑胶质瘤手术标本采用胰蛋白 酶消化获得单细胞，用CDl33免疫磁珠分离阳性细胞、之后分别应用无 加10％胎牛血清诱导分化，免疫细胞化学染色检测肿瘤球细胞及其分化 一步应用之前均行CDl33免疫磁珠复选。同一时间点行流式细胞仪检测 细胞周期，比较增殖活力。 【结果】从人胎脑分离的细胞培养在含有EGF和bFGF的无血清培 神经干细胞与脑肿瘤干细胞体外培养的生长特性比较 中文摘要 养基中，能形成大量的神经干细胞球，这些神经干细胞球可在体外扩增 及传代培养。免疫细胞化学鉴定神经干细胞球中大部分为Nestin表达阳 的细胞。胶质瘤细胞系、组织中分选出的CDl33阳性细胞在上述条件下 培养也出现呈球形聚集生长，同神经干细胞亦能多向分化。流式结果显 示脑肿瘤干细胞较神经干细胞多处于增殖期。 【结论】从引产的人胚胎脑皮层分离出的细胞，在含有EGF和bFGF 的无血清培养基中培养，见到了具有自我更新能力和多向分化潜能的神 经干细胞，其含有CDl33阳性细胞。胶质瘤细胞系及手术组织中含有 CDl33阳性细胞，在与神经干细胞相同的培养条件下，可以增殖和多向 分化，具有干细胞特性。脑肿瘤干细胞的生长增殖能力较正常神经干细 胞强。CDl33免疫磁珠分选方法简便易行，但存在漏筛和错筛的可能。 关键词：神经干细胞；胶质瘤；肿瘤干细胞；免疫组化 作 者：朱玉德 指导老师：黄强教授 神经干细胞与脑肿瘤干细胞体外培养的生长特性比较 英文摘要 anddifferentiationof human Cultivation、proliferation neuralstemcells braintumorStem embryonic and Cellsinvitro Abstract the of methods and invitro isolation，cultivation [Objective]Toexplore expansion ofhuman neuralstemcellsandbraintulnorstemcellsandtoobservethe embryonic characteristicsof anddifferentiationinvitro．Toestablish proliferation the of