阿霉素中毒大鼠膈肌骨架蛋白和肌浆网钙泵的表达变化及意义.pdfVIP

· 244 · 中国药理学通报 ChinesePharmacologicalBulletin 2010Feb；26(2)：244～7 阿霉素中毒大鼠膈肌骨架蛋白和肌浆网钙泵的表达变化及意义 胡 杰，于 影，高 琴，关宿东 (蚌埠医学院生理学教研室，安徽 蚌埠 233003) 中国图书分类号：R979．11；R730．53 的重要因素。肌浆 网钙泵 (sarcoplasmicreticulum 文献标识码：A 文章编号：1001—1978(2010)02—0244—04 Can —ATPase SERCA)是将胞质中的ca¨摄人肌浆 ， 摘要：目的 观察不同剂量阿霉素诱导大鼠膈肌急性损伤时 网的一种钙转运蛋 白，从而引起并保持肌肉细胞舒 膈肌收缩特性的变化与大鼠膈肌细胞骨架蛋白和肌浆网钙 张。本实验通过一次性腹腔注射不同剂量ADM观 泵表达变化的关系。方法 一次性腹腔注射阿霉素制备急 察膈肌组织的SERCA和titin、nebulin基因表达变化 性膈肌损伤动物模型，6SD大 鼠随机分成 ：阿霉素低剂量 与膈肌收缩特性变化的关系，拟从分子机制探讨一 组 (10mg·kg )、中剂量组 (20mg·kg )和高剂量组 (40 次性腹腔注射ADM对膈肌急性损伤的可能机制。 mg·kg )及对照组，每组10只。对照组用生理盐水腹腔注 1 材料与方法 射。3d后剖胸取膈肌 ，应用体外灌流大鼠膈肌肌条方法 ， 分别测量其单收缩张力 (Pt)、最大强直张力 (Po)、峰值收缩 1．1 材料 时间(CT)、半舒张时问(1／2RT)，张力最大上升速度 (+dt／ 1．1．1 实验动物 6清洁级SD大鼠体重250～ d￡…)及张力最大下降速度 (一dt／dt…)。应用逆转录聚合 300g，由蚌埠医学院实验动物中心提供。 酶链反应(RT—PCR)测定膈肌骨架蛋 白肌联蛋白(titin)、伴 1．1．2 药品和试剂 盐酸阿霉素购 自深圳万乐药 肌动蛋 白(nebulin)和肌浆 网钙泵 (sarcoplasmicreticulum 业有限公司(批号：080905)；KrebS液(mmol·L～： Ca“一ATPase，SERCA)mRNA的表达。结果 与对照组相 135NaC1，5KC1，2．5CaC12，1MgSO4，1NaH2PO4，15 比，阿霉素中、高剂量模型组大鼠膈肌 Pt，Po，-4-dt／dt…下降 NaHCO3，11C6H12O6，pH7．3～7．4)。TRIzol试剂 (P0．O1)，CT、1／2RT延长(P0．01)。阿霉素中毒大鼠膈 购 自Invitrogen公司；逆转录试剂盒和 PCR试剂盒 肌各基因表达较对照组相比分别降低 (P0．01)。结论 购 自MBIFermentas公司；引物均由上海生工生物工 阿霉素中毒大 鼠膈肌细胞膈肌骨架蛋 白titin、nebulin和 程技术服务有限公司合成。 SERCAmRNA表达下调 ，并可能与膈肌张力改变有关。 关键词：阿霉素；膈肌 ；肌联蛋白；伴肌动蛋白；肌浆网钙泵； 5 ，CTGCACCGCCACGCTGACC一3 基 因表达