几种引起林麝肺部疾病病原菌的分离鉴定及药敏分析.pdfVIP

72 中国兽医杂志2013年(第49卷)第12期 of ChineseJournal Medicine Veterinary 几种引起林麝肺部疾病病原菌的分离鉴定 及药敏分析 程建国‘，冯亚文2，王 朋3，蔡永华。，罗 燕3，邹立扣3，付文龙1，付春梅1，李蓓，，马炳存， (1．匹tJII养麝研究所，四川都江堰611830；2．河北省兽药监察所，河北石家庄050000： 3．四川农业大学资源保护与生态旅游系，I四)ll都江堰611830) 摘要：本研究采用常规鉴定和16SrRNA PCR方法从94份患肺炎的林麝肺部病料中分离鉴定出5株肠道沙门菌、8株 奇异变形杆菌、1株霍氏肠杆菌和1株摩氏摩根菌；小鼠感染试验表明，分离菌株均具有致病性；选用20种常用抗生素分 别进行药敏试验，结果表明：分离菌株对8种抗生素表现出一致的耐药性，具体表现为对青霉素类、3-内酰胺类／抑制剂和 磺胺异恶唑的耐药性最高，对先锋必素，菌必治、头孢噻吩、丁胺卡那霉素、单环菌素和美罗培南高度敏感；但对其他抗生 素的耐药表型不一，耐药性的测定为临床治疗中合理选择药物提供了科学依据。在林麝肺部疾病病原菌研究中，本试验 分离的奇异变形杆菌、霍氏肠杆菌和摩氏摩根菌为首次报道。 rRNA 关键词：林麝；病原菌；分离鉴定；16S PCR；药敏试验 61 中图分类号：$852 文献标识码：A 文章编号：0529—6005(2013)12—0072—04 林麝为国家一级保护动物，其麝香为传统的 1．2培养基和生化反应管麦康凯琼脂(MAC)、 名贵中药材和高级动物香料，具有重要的社会价 伊红一美蓝琼脂(EMB)、s．s．琼脂、胰蛋白胨大豆琼 值和经济价值Ⅲ。为保护及利用麝资源，自1953年脂(TSA)、胰蛋白胨大豆肉汤(TSB)、MH琼脂均购 以来我国开展了人工养麝的研究项目，时至今日 自杭州天和微生物试剂有限公司。糖发酵管(乳 取得了一定的进展，国内虽已成立多个养殖基地， 糖、蔗糖、麦芽糖、葡萄糖和甘露醇)、葡萄糖蛋白 但常见疾病影响着林麝的健康和种群发展，其中 胨水培养基(甲基红M．R_和V—P试验)、蛋白胨水 一个很重要的制约因素就是林麝肺部疾病。 培养基(口5l哚试验)和枸橼酸盐利用培养基均购自 由于林麝资源的稀缺，国内关于林麝肺部疾 杭州天和微生物试剂有限公司。 病病原菌的研究虽有报道，但对于致病菌的生物 1．3主要试剂 Reaction DNA 10×Taq Bufier、Taq 学特性却知之甚少。在进行病因调查时，发现该 聚合酶、dNTP、DNAMarker(DL一2000)、GoldView． 病以体温升高，短咳，脓样鼻漏，肺脏化脓，偶见肝 上述试剂购自北京天根生物科技有限公司。 rRNA 脏肿大为主要特征。通过常规鉴定和16S 16S 7一 1．4引物合成 rRNA扩增引物：27F(5 PCR方法，笔者分离到多种致病菌，其中包括5株 肠道沙门菌、8株奇异变形杆菌、1株霍氏肠杆菌和 l株摩氏摩根菌。本研究对引起该病的病原菌进 工程技术服务有限公司