蛋白酶体抑制剂MG132逆转子宫颈癌细胞HCE1多细胞球体对顺铂耐药的研究.pdfVIP

生堡塑芒挝苤盔!Q!Q堡垒旦筮箜鲞笙堡塑g蔓也』Q坠!燮璺埋!趔：叁哑!!!!Q，!吐笪：丛堡兰 ·287· ．基础研究 蛋白酶体抑制剂MGl32逆转子宫颈癌细胞 HCEl多细胞球体对顺铂耐药的研究 吴宜林杨红杰 王可可 陶光实 刘毅智 胡芸 【摘要】 目的构建宫颈鳞痈细胞系HCEl的多细胞球体模璎，研究蛋白酶体抑制剂MGl32对 其顺铂天然耐药的影响，探讨MGl32是否可以逆转HCEl多细胞球体的天然耐药及其可能的机制。 方法 (1)采用液体重叠法和旋转法建立HCEl多细胞球体模型；(2)用MGl32、顺铂分别干预HCEl 单层细胞及多细胞球体，分为MGl32组、顺铂组、MGl32+顺铂组、对照组，锥虫蓝拒染法检测细胞抑 制率，流式细胞仪检测细胞周期及凋亡率；(3)用蛋白印迹法和免疫组化方法分别检测HCEl单层细 胞及药物f预前后多细胞球体中核因子KB(NF-KB)和B细胞淋巴瘤／白血病2蛋白(1∞1-2)的表达。 结果(1)成功建立了HCE!多细胞球体模型。(2)HCEl单层细胞和多细胞球体的细胞抑制率： MGl32组分别为(11．67±2．34)％和(10．78-1-1．17)％，两者比较，差异无统计学意义(P0．05)； MGl32+顺铂组分别为(92．674-2．52)％和(91．33±2．18)％，两者比较，差异也无统计学意义(P 0．05)；顺铂组分别为(45．014-7．44)％和(9．45±5．98)％，两者比较，差异有统计学意义(P0．05)。 (3)HCEI单层细胞和多细胞球体的凋亡率：MGl32组两者凋亡率分别为8．14％和5．97％，MGl32+ 顺铂组两者凋亡率分别为99．01％和95．22％；顺铂组两者凋亡率分别为33．61％和0．88％。(4)NF． KB的相对表达量和bel-2的高表达率：HCEl多细胞球体对照组分别为0．67、60％，顺铂组分别为 球体模型对顺铂廿J产生天然耐药，是体外研究宫颈癌对顺铂耐药的良好模型。(2)MGl32对HCEl 多细胞球体有抑制增殖、诱导凋亡的作用，町部分逆转HCEl多细胞球体对顺铂的天然耐药性，其机 制可能与NF—KB、beI．2表达下调有关。 l关键词】宫颈肿瘤；细胞系，肿瘤；球形体，细胞；抗药性，肿瘤；顺铂；亮肽菌素类 Reversionofresistaneeto induced incervical cisplatin byMGl32 cancercellHCEImulticelinlar WU YurL spheroid Yi．尻n，yA，vGHong-y如，吼NGKe—ke，TA0Guang—shi，12UYi-zhi，HUDepartment and ofObstetricsGynecology，SecondXiangyaHospital，Central—SouthUniversity。Changsha4{∞11．China Correspondingauthor：WUYi．1in，Email：wuyilinlaoshi@126．cofft To theeffectofthe inhibitor 【Abstract】Objectiveinvestigate pathway ubiquitin—proteasome MGl32ollthenaturalresistanceto inthe cisplatinhumaneervicalcancerline(HCEI)multiceUular andto itifMGl32couldreverse山eHCEl／MCSresistanceto spheroid(HCEl／MCS)modelprobe well幽the w88 possiblemechanis