益气活血复方含药血清对人脐静脉内皮细胞Toll样受体4及LOX-1表达的影响.pdfVIP

LISHIZHENMEDlCINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2011VOL22NO．12 时珍国医国药2011年第22卷第12期 益气活血复方含药血清对人脐静脉内皮 细胞Toll样受体4及LOX一1表达的影响 姜华1，姜玉姬1，张艳2 umbilical veinendothelial cells，HUVECs)Toll样受体4(Toll—like receptor likeoxidized low—densitylipoprotein d。末次灌 中浓度组、中药低浓度组，每组5只。以上各组白兔分别以生理盐水和高、中、低浓度益气活血复方连续灌胃7 胃给药2h后，心脏采血，离心后分离血清；体外培养人脐静脉内皮细胞，用LPS刺激后，分别加入高、中、低浓度益气活血 mRNA和蛋 复方含药血清干预，24h后收集细胞，用荧光定量PCR方法和Westernblotting法分别测定TLR4和LOX一1 白的表达。结果用LPS刺激人脐静脉内皮细胞后，引起TLR4和LOX一1mRNA和蛋白的高表达(与空白对照组比较P 0．01)，用益气活血复方含药血清干预以后显著抑制TLR4及LOX一1mRNA和蛋白的高表达(与模型组比较P 化的作用机制之一。 关键词：中药含药血清； 内皮细胞；TLR4；LOX一1；动脉粥样硬化 DOI标识：doi：10．3969／i．issn．1008-0805．2011．11．038 中图分类号：R285．5文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2011)12-2913-02 近年来，多种中药已经被用于防治动脉粥样硬化及其相关疾 养的内皮细胞符合内皮细胞特征，抗人Ⅷ因子抗体染色阳性。采 病，并显示出良好的作用。益气活血复方具有良好的防治动脉粥 用培养的第2～4代内皮细胞，待细胞生长融合成单层后用于实 样硬化的作用，但该药抑制动脉粥样硬化的分子生物学机制及其 验。 与他汀类药物疗效的比较尚不明了。因此我们在实验中应用 2．2含药血清的制备20只新西兰白兔随机分为4组：正常组、 LPS刺激人脐静脉内皮细胞，诱导TLR4及LOX一1激活，并用益 中药高浓度组、中药中浓度组、中药低浓度组，每组5只。每天上 气活血复方含药血清进行干预，同时以阿托伐他汀作为西药对照 午中药高、中、低浓度组分别以高、中、低浓度益气活血复方灌胃。 组，观察其对TLR4和LOX一1表达的影响，探讨益气活血复方防 动物给药量：高浓度组：13．2g／kg；中浓度组：6．6g／kg；低浓度 治动脉粥样硬化的机制以及与阿托伐他汀疗效比较。 组：3．3 d。末次 g／kg。正常组以同等量的生理盐水灌胃，连续7 1材料 灌胃给药2h后(灌药前禁食不禁水12h)，心脏采血，离心后分 1．1 药物益气活血复方由黄芪、人参、红花、丹参、川芎和当归 离血清，合并同组含药血清，0．22 p．m微孑L滤膜过滤后，一80qc保 h、1h和45rain，合并煎煮液后 组成，水煎3次，时问分别为1．5 存备用。 过滤浓缩至高(含生药1．6g／m1)、中(含生药0．8g／m1)、低(含 生药0．4 Laboratorie