硫代硫酸银对二倍体马铃薯花药培养的影响.pdfVIP

作物杂志Crops 2011．3 硫代硫酸银对二倍体马铃薯花药培养的影响 李文霞1 张永根2 石瑛1 吕文河1 (1东北农业大学农学院，150030，黑龙江哈尔滨；2东北农业大学动物科技学院，150030，黑龙江哈尔滨) 摘要 以二倍体马铃薯栽培种S．phureja—花药培养的影响，为解决乙烯抑制胚状体的诱导 问题提供理论依据。 S．stenotomum(PHU．STN)杂种BDl0-7基因型为 试验材料进行花药培养，探讨培养基中添加乙烯 1材料与方法 拮抗剂AgNO，和硫代硫酸银(STS)对褐化和愈伤 诱导的影响。结果表明：培养基中添加乙烯拮抗 1．1 材料 荆对降低二倍体马铃薯花药培养的褐化率和促进 以原始二倍体马铃薯栽培种S．phureja— 愈伤诱导率效应显著。AgN03和STS对降低褐化 率差异不显著，但STS对二倍体花药培养的愈伤 的无性系BDl0-7基因型为试验材料，实生种子由 诱导率显著高于AgN03。 美国Haynes博士提供。 关键词硫代硫酸银；二倍体马铃薯；花药培 基础愈伤组织诱导培养基为MS+0．5mg／L 养 NAA+0．5mg／LKT+0．5mg／L2，4一D+609／L蔗 糖+7∥L琼脂(pH值5．8)。 花药培养是利用花药进行离体培养形成再生 1．2 方法 植株的技术，花药培养的目的是为了获得单倍体 试验设3个处理，处理1为培养基中不添加乙 植株。由于植物的组织、细胞及器官进行离体培 烯拮抗剂，作为对照；处理2为培养基中添加 0．3mmol／L 养是在一个相对封闭的无菌环境中，因气体交换 AgN03；处理3为培养基中添加 1mmol／L 受到限制常导致培养器皿中产生大量的乙烯…。 STS。 马铃薯对乙烯极为敏感，褐化速度很快，花药培养 试验材料于2008年4月2313种植于哈尔滨 中花药褐化后产生的有毒物质常常影响着胚状体 东北农业大学实习基地。试验地地势平坦，6月 等的诱导心】。这是因为由酚类物质氧化成的醌类 2613开始采集花药。花蕾经自来水冲洗10— 物质阻碍植物细胞生长的缘故，而花药培养中所 20min后在超净工作台上，用70％酒精消毒30s， 产生的乙烯能促使花药褐化。 子取出花药接种于愈伤组织诱导培养基上。每瓶 硫代硫酸银(STS)和AgNO。同为乙烯生理作 用拮抗剂，常被用来抑制乙烯的生理作用¨。J。与 接种花药40枚，每个处理接种6瓶，3次重复，完 全随机设计。置于25。C黑暗条件下培养，光暗周 AgNO，相比，STS具有毒性低、易移动、在培养基中 期为16h／8h。15d后统计褐化率，褐化率(％)= 稳定等优点[6]，因此被应用于马铃薯试管苗长期 (褐化的花药数／接种花药数)×100％；30d后统 保存和原生质体供体材料培养上。但STS对马铃 计愈伤组织诱导率，愈伤组织诱导率(％)=(产生 薯花药培养的影响未见报道。本研究通过在培养 愈伤组织的花药数／接种花药数)×100％。