猪轮状病毒GD1株VP7基因的克隆及序列分析.pdfVIP

广东畜牧兽 医科技 2010年(第35卷箜 塑 试验研究 ·29· 猪轮状病毒 GD1株VP7基因的克隆及序列分析 田小艳，孙 华，邓雨修，苏润环，王东东，宋延华 (广东省温氏集团研究院，广东 新兴 52740@ 摘 要：参考GenBank中发表的PRVOSU毒株VP7基因核苷酸序列ORF两端保守区序列，设计 1对特异 引物，以PRVGD1株反转录cDNA为模板，通过PCR方法扩增出长约 1kb的基因片段，并克隆到pMDI8-T 载体中进行序列测定。测序结果表明：VP7基因全长 1062bp，含有一个981bp的开放阅读框，编码 326 个氨基酸。与国内外已知的13个毒株VP7全长基因的核苷酸及推导的氨基酸序列比较，相似性分别为77． 4％一100％和 78．6％～99．7％；核苷酸系统发育进化树结果表明，GDI毒株与轮状病毒A2，JP3-6毒株亲缘关 系较近，为一个进化群 。 关键词：猪轮状病毒；VP7基因；克隆；序列分析 中图分类号 ：$852．651 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005—8567(2010)O1—0029～03 CloneandsequenceanalysisofVP7geneofporcinerotavirusstrainGD1 TianXiaoyan，SunHua，DengYuxiu，SuRunhuan，W angDongdong，SongYanhua (GunagdongWin’SGroupAcademy，Xinxing527400，China) Ab~raet： A pairofprimerstargetedtheconservedregion flankingtheORF ofVP7geneofporcine rotavims(PRV)strainOSU weredesignedaccordingtothepublishedsequences．ThePCR productof approximately lkb longwasamplified from CDNA ofPRV strain GD1．ThePCR productwascloned into pMD18-Tvectornadsequenced．nlefull-lengthofVP7genewas1062bplongincludingacodingregionof 98lbp，whichencodedaproteinwith326aminoacids．TheVP7geneofthePRV strani GD1shared77．4％ to lO0％ necleotidehomologyWi也 thatofohter13PRV srtains．TheaminoacidsofVP7geneofhtePRV strain GD1shared78．6％to99．7％ amnioacidshomoloyg wim thatofother13PRV stranis．Theresultsshowedthat thestrainGDlwasmoreclosetostrainsA2andJP3．6． Key ：Porcinerotaviru(PRV)；VP7gene；clone；sequenceanalysis 轮状病毒 (Rotaviru，RV)是呼肠孤病毒科 毒外壳的光滑部分；VP7是～种N一联低聚甘露糖 (Reoviridae)轮状病毒属 (Rotavirus)的成员，是 糖蛋 白，VP7是PRV的外衣壳蛋 白，也是一种糖基 各种幼龄动物病毒性腹泻的主要病原之一[1]。猪 化蛋白，由326个 aa组成，因不同毒株而异，分别 轮状病毒病是一种人畜共患病，在猪群 中感染率 由7或 8，9基因编码，为病毒外膜主要中和抗原， 很高，仔猪被 RV感染后，机体免疫力急剧下降，从 决定病毒 的血清型，与病毒 的毒力及免疫保护性