XA21介导的水稻抗病机理初步分析.pdfVIP

分类号： Q2堑：8：Q2堑；l 单位代码： !QQ竖 密级： 公Ⅱ 学号：Q3Q垫21业!!! XA21介导的水稻抗病机理初步研究 The ontheResistance ElementaryStudy XA21 Mediated by 学位申请人：白辉 指导教师：刘国振教授 学科专业：植物学 学位类别：理学硕士 授予单位：河北农业大学 答辩日期：二oo六年六月十日 摘要 Xa21是最早克隆的水稻抗病基因，作为类受体激酶类的广谱抗病基因它受到广 泛的关注。自Xa21被克隆以来，它已经被转化或通过常规方法渗入到多个栽培品 种中。转基因Xa21材料，很可能成为世界上第一个被批准进行大田释放的水稻转 为成株期抗性，苗期抗病性差。如能了解Xa21的抗病机理，无疑将对操纵Xa21介 导的抗病性(比如提高抗性、扩大抗病谱等)产生直接的影响。 本研究是在前人的工作基础上，利用已经获得的水稻试验材料402l和成熟的 蛋白质研究技术，首先对水稻叶片全蛋白质提取方法和XA21蛋白质纯化条件进行 优化，获得了高质量的叶片蛋白和XA21纯化蛋白质。一方面，我们对叶片全蛋白 进行SDS—PAGE和Western Blottmg，检测了不同发育时期、接种和伤害处理不同时 问的水稻叶片中XA21蛋白质表达量的变化；另一方面，我们利用磷酸化抗体对 XA21纯化蛋白质进行了初步的体内磷酸化分析。通过以上试验我们初步探讨了 Xa21介导的抗病反应机制。试验主要结果如下： 行细菌Xoo迁移试验。结果表明：接种后O．5h，Xoo自伤口处沿叶片向下迁移 至少lcm，．为叶片接种取材提供了时间依据。 beads获得了高质 2．通过水稻叶片蛋白提取和XA2l纯化条件的优化，利用c—Myc 量的XA21纯化蛋白质，去除了c-Myc抗体检测的非特异性条带。 时期没有可检测的变化。 的变化。 质，两种抗体结合使用可用来监测水稻体内XA21蛋白质的磷酸化动态变化。 关键词：水稻；XA21；蛋白提取：纯化：WestemBlo惟ng；磷酸化 The ontheResistanceMechanismMediatedXA21 Study by Elementary Master HIli candidate：BAI Major：Botany Guozhen Supervisor：LIU Abstract Xa21，thefnstdiseaseresistanceclonedfrom sativa a gene rice(OryzaL．)，encodes kinaseandconfersbroad resistance Xanthornonas