世界双遗产四川峨眉山民族医药代表植物RAPD指纹分析.pdfVIP

西 族大 ‘ 版 南民 学学报 自然 学 第36卷第 1期 J 1 Jan．20l0 ． oumalofSouthwestUniversityforNationalitiesNatural1ScienceEdition 文章编号：1003—2843(2010)01—0091．04 世界双遗产四川峨眉山民族医药代表植物RAPD指纹 分析 熊莉丽 ，王万军 ，郭志云 ，李迪强 ，茆灿泉 (1．西南交通大学生命科学与工程学院分子进化与应用生物学实验室，四川成都 61003l；2．中国林业科学院森林生态环境与保护 研究所，北京 l00091) 摘 要：采用RAPD分子标记技术对峨眉山白术、车前草、叶下珠、黄花蒿、红花醉浆草、马兰花、马鞭草和斑鸩菊 等民族药用资源进行了遗传多样性分析．从48条 10．mer引物中筛选获得 了l5条RAPD-PCR能够扩增出重复条带的引 物．这些引物扩增的RAPD．PCR图谱可用于白术、车前草、叶下珠、黄花篙、红花醣浆草、马兰花、马鞭草和斑鸠菊 药材的鉴定．本研究对世界自然与文化双遗产峨眉山保护区民族药用植物的鉴定和资源保护、利用具有一定的指导意 义 ． 关键词：峨眉山；药用植物；RAPD；民族医药 中图分类号：R28 文献标识码：A 峨眉山位于川西平原，是世界自然与文化双遗产名录成员之一，气候上表现为湿润、多雨等特点，从而形成 了复杂多样的生态圈，所以拥有极为丰富的生物种类，其中稀有物种繁多，有高等植物3200多种，是研究世界生 物区系等科研活动的重要地点．据不完全统计，峨眉山稀有、濒危植物已达200多种 】【J，其中列为1984年中国珍稀 濒危保护植物名录的有34种2【；列为1999年国家重点保护野生植物名录的有23种3【】．峨眉山区域内主要为汉族， 周边与藏族和彝族聚居区相连接，民族医药植物种类丰富4【】．利用现有的分子标记技术对峨眉山药用植物从分 子水平进行指纹鉴定分析，对峨眉山民族药用植物资源的鉴定、保护和利用具有重要的意义和价值． 本文以峨眉山保护区菊科、豆科、酢浆草科、马鞭草科等科属民族药用植物作为实验材料，采用RAPD分子 标记技术进行自然保护区药用植物基因指纹研究工作，为自然保护区民族医药标本的鉴定提供基础数据与支撑． 1 材料与方法 1．1 实验材料 以采自四川峨眉山自然保护区的白术、车前草、叶下珠、黄花蒿、红花醉浆草、马兰花、马鞭草和斑鸠菊 等代表要用植物的幼嫩叶片为实验材料提取基因组DNA． 1．2 实验试剂 DNA聚合酶 (rTaq)购自大连宝生物工程有限公司；RAPD随机引物由上海生物工程有限公司合成；DNA Marker购自北京东盛有限公司；Tris碱和8．巯基乙醇为进口分装试剂；其余试剂为国产分析纯试剂． DNA提取缓冲液为 100mmol／LTris—HC1(pH8．0)、50mmol／LEDTA(pH8．0)、500mmol／LNaCI，临使用 前加入 2％的B．巯基乙醇 J． 收稿 日期：2009·12·06 作者简介：熊莉丽(1980．)，女，西南交通大学生命科学与工程学院分子进化与应用生物学实验室讲师． 基金项目：国家科技部自然科技资源平台子项 目“自然保护区生物标本整理、整合与共享试点(2005DKA21404)；西南交通大学 “生 物信息与功能基因组学”团队建设项 目；西南交通大学发展潜力学科项 目；西南交通大学青年教师百人计划项 目；西南 交通大学青年教师科研起步项 目(2009Q057)． 92 西南民族大学学报 ·自然科学版 第36卷 1．3 提取方法 1-3．1 提取程序 样品基因组DNA的提取参照文献o【，． 1．3．2 基因组