金属富勒烯与顺铂联合使用抑瘤作用及其机理研究.pdfVIP

摘 要 新型纳米材料水溶性金属富勒烯[Gd@C (OH) ] 以其独特的生物学特性在抗癌研 82 22 n 究中发挥着重要作用，它以低毒和高效抑瘤的特点引起各国学者的关注。对其抗癌机制 和毒副作用的深入研究将为临床癌症治疗提供信息。本研究以接种肝癌H22肿瘤细胞的 小鼠为动物模型，应用纳米颗粒的表征技术、电镜技术、激光动态光散射仪、流式细胞 仪、质谱、组织化学技术、分子技术等手段在动物水平、细胞水平、分子水平研究了 [Gd@C (OH) ] 和传统化疗药物顺铂对正常小鼠、腹水瘤小鼠和实体瘤小鼠进行了抑 82 22 n 瘤机制和毒副作用、逆转肿瘤抗药性方面做了探讨，取得了以下研究结果： 1、[Gd@C (OH) ] 在生物体系中良好的稳定性，提供了研究其抑瘤作用的可行性。 82 22 n [Gd@C (OH) ] 在水溶液中呈聚集状态，大小为50 nm左右，分散性和水溶性较好。 82 22 n 在水溶液中质地较软，具备完好的笼型结构。表面电荷为 -8.52±1.65 mV ，呈弱负电形 式，具备稳定的微晶结构。此颗粒在生理盐水或1640培养基中同样具备很好的稳定性和 分散性，这为研究它在抑瘤方面的作用提供了前提条件。 2 、[Gd@C (OH) ] 与顺铂的联合作用有效提高对小鼠肝癌实体瘤的抑制效率。 82 22 n [Gd@C (OH) ] 不能抑制小鼠肝癌腹水瘤，但可有效抑制实体瘤生长（抑制率 82 22 n 50% ），肿瘤细胞在不同的生长环境中营养方式供给的差异造成细胞增殖速度不同可能 是造成这种现象的原因。细胞实验证实[Gd@C (OH) ] 对小鼠肝癌细胞不具备直接杀 82 22 n 伤作用。另外，[Gd@C (OH) ] 对正常鼠肝癌实体瘤的抑制效果好于裸鼠肝癌实体瘤 82 22 n 的抑制效果，说明[Gd@C (OH) ] 的抑瘤作用有可能是通过激活细胞免疫激活机制达 82 22 n 到抑瘤作用的。有趣的是，在细胞和动物水平上证实了[Gd@C (OH) ] 与顺铂的联合 82 22 n 作用可有效提高实体瘤的抑制效率，与单独使用顺铂相比其抑制率提高了 17%。 3、首次将铁代谢与顺铂造成的脾损伤联系起来研究其相互关系。顺铂对小鼠脾脏 的特异性损伤可能与铁在脾脏的巨噬细胞中的沉积相关。 利用组织化学技术分析 [Gd@C (OH) ] 处理小鼠后的脏器结构表明， 82 22 n [Gd@C (OH) ] 对机体无毒副作用。低剂量顺铂可造成小鼠脾脏的特异性损伤，而对 82 22 n 其它器官没有伤害，通过低剂量顺铂连续注射小鼠会使其脾脏中的含铁血黄素沉积显著 升高。进一步研究其机制发现，顺铂处理使动物体红细胞受损，受损红细胞被脾脏中的 III 巨噬细胞吞噬，铁从红细胞内释放铁后增加了巨噬细胞内铁的含量。高铁诱导了FPN1 、 Ferritin 和 Hepcidin 的表达，Ferritin 与 FPN1 在结合铁上存在竞争，限制了铁的外排， 另外，Hepcidin 会与 FPN1 结合使其内化，减弱了 FPN1 外排铁的