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水牛胚胎分割的初步研究
摘要
本研究主要探讨水牛桑椹胚去致密化、分割液、分割方法和胚胎发育
时期对胚胎分割效果的影响及取样胚冷冻的可行性。借助显微操作仪,将
体外受精的水牛桑椹胚(第5d)和囊胚(第6~7d)分割,体外培养半胚,观察
其发育情况。结果发现:11水牛桑椹胚经去致密化处理分割,其分割成功
率(68.O%VS50.6%)和囊胚发育率(57.9%VS41.O%)均显著高于未处理组俨
MS组与
0.01),囊胚细胞数差异不显著(P0.05);2)在PBS+0.2
67.26%Vs
MS与PBS+5%PVP中分割囊胚,其分割
差异显著性(PO.05);在PBS+0.2
成功率显著高于PBS(79.13%、76.73%VS
的囊胚发育率及囊胚细胞数三者差异均无显著性(P0.05);3)用直接分割
71.49%,
法和单臂分割法分别分割桑椹胚和囊胚,其分割成功率(70.76%VS
79。02%VS
80。77%)、囊胚发育率(57。27%vs57,60%,67.26%VS68.94%)和囊
胚细胞数三者均无显著差异性俨O.05);4)早期囊胚的分割成功率显著高
VS
于桑椹胚和扩展囊胚的(84.1796
也显著高于桑椹胚(74.99%VS58.31%)(P如.05),也稍高于扩展囊胚的
(74.99%VS
66.7%)和孵化囊胚率
5)取样胚和整胚冷冻.解冻后的存活率(34.9%VS
(13.9%VS
密化有利于分割后胚胎的成活和发育;2)在PBS中分别添加O.2M的蔗糖
和5%的PVP有利于提高水牛桑椹胚和囊胚的分割成功率;31直接分割法
和单臂分割法均适合于水牛桑椹胚和囊胚的分割;钔相对桑椹胚和扩展囊
胚而言,水牛早期囊胚更适合于分割;5)水牛囊胚经取样后冷冻.解冻其成
活率虽低于整胚,但仍可正常发育孵化至囊胚。
关键词水牛桑椹胚囊胚胚胎分割
Ⅱ
PLITTINGINBUFFALO
EMBRYO
ON
STUDIES
this wasto thefactors the
The of study investigate affecting
objective
of
decompaction
of buffalo,including
embryosplitting(Es)in
efficiency
methodsand stage·
embryodevelopment
solutions,splitting
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Andthe of blastocystsinvestigated·
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