外周血循环上皮细胞检测及在肺癌患者的临床应用价值与研究.pdfVIP

缩略词表 PBS： salinesolution phosphate-buffered TBS：tris-bufferedsalinesolution BSA：bovinesennn albumin DAPI： 4．．6-diamidino-2-phenylindole AS： AVIVA solution PIiA： paraformalclehyde CK： eytokeratin CTC： tumorcell circulating CEC： cell circulatingepithelial 3 外周血循环上皮细胞检测及其在肺癌患者的临床应用价值研究 背景及目的肺癌是严重威胁人类健康的疾病，其病死率居所有恶性肿瘤之首， 发病率呈逐年上升趋势。而且肺癌患者的5年生存率仅15％，多数患者在病程中 出现脑、骨、肾上腺等远隔器官转移，严重影响着患者的预后。本研究的目的在 于探索一种运用免疫磁珠富集并结合荧光细胞化学染色的方法来检测循环上皮 细胞(circulatingepithelialcell)的可行性；了解循环上皮细胞与肺癌患者性别、年 龄、临床分期、肿瘤病理分型等临床特征的联系；探索循环上皮细胞与远处器官 转移的相关性；探讨化疗前后外周血循环上皮细胞的变化；初步评价循环上皮细 胞与放射影像学变化及临床疗效评价的相关性。方法 自2006年4月至07年4 月在北京协和医院体检的健康志愿者和在该院呼吸科接受住院治疗的患者作为 研究对象。设立正常对照组、良性肺疾病组及肺癌组三个试验组，采集正常组静 脉血标本及未接受治疗患者治疗前外周静脉血标本。采用免疫磁珠富集分离及免 疫荧光细胞化学染色方法检测外周血细胞角蛋白(cK)18／19表达阳性细胞。再 以初治肺癌患者为研究对象，入选者均接受常规化疗，两个周期后初步评价临床 疗效，并在化疗前及化疗后采集静脉血标本作循环上皮细胞检测。结果正常组 纳入16例，其中1例循环上皮细胞检测结果为阳性，阳性率为6．2％；非肺癌患 者组纳入12例，仅l例检测结果为阳性，阳性比为8．1％。肺癌组纳入36例患 者，治疗前外周血中循环上皮细胞检测的阳性比为64％(23／36)。其中有17例 肺癌患者进行了治疗前后监测，治疗前CTC阳性比为76％(13／17)，治疗后阳 者中Ⅲ期患者的CTC检测结果阳性比为41％，IV期患者检测阳性结果比率为84％。 不同病理类型(包括腺癌、鳞癌、小细胞癌)肿瘤患者的CTC检测结果阳性率分 别为74％、25％、62％。结论免疫磁珠阴性富集分离法结合荧光细胞化学染色方 法检测循环上皮细胞过程较为简便，检测的特异性93％，敏感性64％。检测方 法的准确性的提高有待于发现更加特异和敏感的肺癌相关抗原及抗体。应用这种 检测方法研究显示，循环上皮细胞的阳性率在肺癌患者和非肺癌患者问存在显著 4 差异。其阳性率与有无远处转移密切相关，但与性别、年龄及肿瘤的病理类型无 关。循环上皮细胞在化疗前后的变化与临床治疗相关，治疗前循环细胞数高于治 疗后细胞数，其高低变化与临床疗效有一定相关性，但研究样本有限，需待进一 步扩大样本来补充完善。此外，本研究因观察时间有限，未能对循环细胞与患者 预后的关系迸行探讨，因此，对已纳入的研究对象需进～步作密切随访研究以了 解循环细胞与患者长期生存及预后的相关性。 关键词 循环肿瘤细胞，循环上皮细胞，肺癌，免疫磁珠，荧光细胞化学染色 细胞角蛋白18，细部角蛋白19，白细胞相关抗原 5 Newmethodtodetect eeHsin bloodof circulatingepithelialperipherallung