还原糖的鉴定.pptVIP

实验一: 生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 一、实验原理： 某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 、可溶性还原糖＋斐林试剂　 砖红色沉淀 、脂肪＋苏丹III　 　橘黄色 脂肪＋苏丹IV　 　红色 3、蛋白质＋双缩脲试剂　 　紫色反应 深入原理 1.可溶性还原糖的鉴定原理： 生物组织中常见的可溶性糖有葡萄糖、果糖、麦芽糖、蔗糖。前三种糖分子中都含有游离的具有还原性的半缩醛羟基，因此叫还原性糖，而蔗糖的分子中没有，因此叫非还原性糖。 斐林试剂与可溶性还原糖在加热的条件下，生成砖红色的Cu2O沉淀。如用沸水浴加热，Cu2O沉淀颗粒较大，呈现砖红色；如用酒精灯直接加热，Cu2O沉淀颗粒较小，呈现黄色。 深入原理 2.蛋白质的鉴定原理： 在碱性溶液（NaOH）中，双缩脲（H2NCO－NH－CONH2）能与Cu2＋作用，可形成紫色或紫红色的络合物，这一反应称双缩脲反应。凡在本身结构中具有双缩脲基的化合物，都能进行双缩脲反应，这是特定的颜色反应。蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键(两个相邻的肽键与双缩脲结构相似)，因此又称为肽键反应。 深入原理 3.脂肪的鉴定原理： 苏丹染料在脂肪中的溶解度大于酒精中的溶解度，用苏丹染料的酒精溶液处理含有脂肪的生物组织时，酒精中的苏丹进入脂肪中，在脂肪中溶解、积累，并吸附在脂肪颗粒结构上，呈现出橘黄色（苏丹III ）或红色（苏丹IV） 。 三、试剂 ： 1、斐林试剂 A液 质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液 B液 质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液 2、双缩脲试剂 A液 质量浓度0.1g/mL的NaOH溶液 B液 质量浓度0.01g/mL的CuSO4溶液 3、苏丹III 0.1g苏丹III干粉，溶于100mL体积分数为95%的酒精中，待全部溶解后再使用。 　五、 注意事项： 　1、合理安排 ，注意安全 2、苹果组织液必须临时制备，保存时间不能过长 3、双缩脲试剂B（CuSO4）不能多加 　六、讨论与探究： 　1、你能否用鉴定可溶性还原糖的方法，对青菜叶、韭菜叶和甘蔗茎做相应的鉴定？ 2、你有没有简便、直观的方法证明花生种子中含有脂肪组织？ 3、如果要想更进一步验证面团、鲜牛奶、奶粉中的有机成分，你会怎样改进本实验？ * 显微镜的结构 显微镜的使用 1、安放； 2、对光； 3、调焦； 4、观察。 二、实验材料： 蛋白质 脂肪 可溶性还原糖 选用的材料 适宜材料 鉴定的有机物 含糖量较高、颜色为 白色或近于白色的植 物组织 富含脂肪的种子 富含蛋白质的 生物组织 苹果汁 花生种子 豆 浆 脂肪细胞＋苏丹III 四、实验步骤 1、可溶性还原糖的鉴定 制备生物组织样液 取材、研磨、过滤 取样 取2ml组织样液注入试管 注入试剂 向试管中加入2ml 刚配制的斐林试剂 加热（煮沸2min），观察 2、蛋白质的鉴定 制备生物组织样液 取材、研磨、过滤 预备组织样液 注入组织样液 取一支试管注入 黄豆组织样液2ml 注入试剂A 加入2ml双缩脲 试剂B，摇匀 观察颜色变化 注入试剂B 试剂A 滴入3~4滴双缩脲 3、脂肪的鉴定 制备生物组织实验材料 去种皮、削平面、切片 染色 滴2～3滴苏丹III染液染色2～3分钟 去浮色 在玻片上滴1～2滴体积分数为 50％酒精溶液，洗去浮色 制作临时装片 放在显微镜下观察（先低倍镜后高倍镜） *