成鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化的实验研究.pdfVIP

Y9D8992 中文摘要 成鼠骨髓基质细胞向神经干细胞诱导分化的实验研究 摘要 『目的1神经干细胞移植治疗神经系统疾病是生命科学重要研究内容之一。但是，无 论足胚胎或成体的神经f细胞，作为移植细胞尚存在相当大的缺陷。如来源不足， 采集团难，免疫排斥，道德伦理及法律等方面的限制。骨髓基质细胞是一种特殊成 体十细胞。它具有几乎和胚胎干细胞一样多的分化潜能，能诱导分化成几乎所有的 体细胞类型。骨髓基质细胞容易获取并可用于自体移植。而且可以在一定条件下诱 导成神经细胞，这为神经干细胞的应用提供了无限制的来源，克服了从脑组织获取 神经干细胞的危险性和局限性，也避免了胎儿脑组织移植中存在的伦理和免疫排斥 问题。本实验以SpmgueDawley(SD)成年大鼠为实验对象，研究成年大鼠骨髓基质 细胞体外培养的增殖和分化特点。为神经干细胞移植提供更多的理论依据。 【方法l成年sD大鼠，雌雄不拘，鼠龄5～6月，体重150≈009。在细胞培养室内超 净工作台上耿材。用股骨、胫骨灌洗法采集成年大鼠骨髓细胞，密度梯度离心法分 factor，EGF)、碱性成纤 离出骨髓基质细胞。利用表皮生长因子(epide珊al目。州h 维卸{胞幽子(basjc舳roblastbFOF)等增艄及分化诱导网子和神经干细 growth南ctoL 胞培养液进行培养，诱导分化，用细胞免疫组化染色进行细胞鉴定。 【结果l成年大鼠骨髓基质细胞在体外培养48h后，大部分细胞贴壁，部分细胞展开 成梭形或扁平状，渐形成单细胞层。4~7d出现多个细胞聚集的细胞克隆团，将其机 械分离成单细胞悬液，重新种植，舡5d即有新的细胞克隆出现。经分化诱导3~4d 后，从细胞球周围迁出不同形态的细胞，渐分化出大而稍网的细胞，以及双极细长 突起的神经元样细胞。 【结论】骨髓基质细胞具有较强的自我更新及多向分化能力．在适宜的诱导分化条件 下，可诱导为神经干细胞，分化出神经元和胶质细胞。本实验采用的培养方法适合 骨髓摹质细胞的体外培养。 硕士研究生：赵英杰(神经外科) 指导教师：姚维成副教授 [关键词]骨髓基质细胞；神经干细胞；细胞培养：克隆 英文摘要 A onthecultureanddifferentiationofbone pilotstudy marrOwstromalcellsfromadultrats Abslract stemcell find hasraised matrcsearcherscan 【0bjectiVe】NeuraltransplaJltationhopes to nervous stemcells行om oraduIt system embr)ro waysrepair damage．However，neural centralnervous have to thelimited matly system disadvantagestransplatltation，including donor“ssue etc．Butbonem脚w source，jmm