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生物秀-专心做生物！ 实验 13 蛋白表达的 Western Blot 检测 实验目的： 使学生掌握 Western Blot 印迹法检测蛋白质的实验技术。 实验原理： 蛋白质印迹法是将蛋白质混合样品经 SDS后，分离为不同条带，其中含有能与 特异性抗体（antibody ）结合的待检蛋白质（抗原，antigen ），将PAGE 胶上的蛋白条带转移 到硝酸纤维素（Nitrocellulose ，NC ）膜或聚偏二氟乙烯 [poly(vinylidene difluoride) ，PVDF ）] 膜上，此过程称为转印（blotting ），以便随后的免疫学检测。转印后，将NC 膜或 PVDF 膜 与抗血清（含特异性抗体，即第一抗体）一起孵育，使第一抗体与待检蛋白结合，再用酶标 第二抗体孵育膜，使第二抗体与第一抗体结合反应。最后用酶的显色底物或发光底物显示靶 m 蛋白条带（图 13-1、2 、4 ）。