实时荧光定量PCR技术研究进展及其应用.pdfVIP

第41 卷第8 期 东 北 农 业 大 学 学 报 41(8): 148~155 2010 年8 月 Journal of Northeast Agricultural University Aug. 2010 实时荧光定量PCR 技术研究进展及其应用 陈 旭，齐凤坤，康立功，李景富 （东北农业大学园艺学院，哈尔滨 150030） 摘 要：实时荧光定量PCR 技术是在PCR 反应体系中加入荧光染料或荧光探针，利用荧光信号积累实 时监测整个PCR 反应进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析，具有操作简便、快速高效，高通 量，而且高敏感性等特点，该技术在分子诊断、分子生物学研究、动植物检疫以及食品安全检测等方面有广 泛的应用。文章对实时荧光定量PCR 的原理、影响因素以及在植物病害和遗传育种方面的应用等进行了 综述。 关键词：实时荧光定量PCR ；分类；影响因素；应用 中图分类号：Q503 文献标志码：A 文章编号：1005-9369 （2010）08－0148－08 Advance and application of real-time fluorescent quantitative PCR/CHEN Xu, QI Fengkun, KANG Ligong, LI Jingfu(College of Horticulture, Northeast Agricultural University, Harbin 150030, China) Abstract: Real-time fluorescent quantitative PCR, in PCR reaction system by adding fluorescent dyes or fluorescent probes, real-time monitoring of fluorescence signal accumulation process of the PCR reaction, standard curve by quantitative analysis of the unknown template, simple, fast, efficient, high-throughput and the characteristics of high sensitivity. The technology in molecular diagnostics, molecular biology, animal and plant quarantine and food safety testing has a wide range of applications. Article on the principle of real-time fluorescent quantitative PCR, factors and plant diseases and genetic breeding of the application were reviewed. Key words: real-time fluorescent quantitative PCR; classification; factors; application 自1985 年，美国Perkin-Elmer Cetus 公司人类 控PCR 反应的进程，根据PCR 反应的数学函数关 遗传研究室Mullis 等发明了具有划时代意义的聚合 系，结合相应的算法，通过加入标准品的方法，就 酶链反应（Polymerase chain reaction, PCR），使人们 可以对待测样品中的目标基因进行准确定量。但 梦寐以求的体外无限扩增核酸片段的愿望成为现 Higuchi 利用