普通电泳的原理.pptVIP

普通电泳的原理 生物大分子（如蛋白质，核酸，多糖等）大多都有阳离子和阴离子基团,称为两性离子。常以颗粒分散在溶液中，它们的静电荷取决于介质的H+浓度或与其他大分子的相互作用。 在电场中,带电颗粒向阴极或阳极迁移，迁移的方向取决于它们带电的符号,这种迁移现象即所谓电泳。 电泳的样品支持物，生物实验大多为凝胶。 普通电泳设备组成 电泳仪 + 电泳槽 普通电泳槽分三种：水平电泳垂直电泳转移电泳 水平电泳 用琼脂糖凝胶作支持物的电泳法。借助琼脂糖凝胶的分子筛作用，核酸片段因其分子量或分子形状不同，电泳移动速度有差异而分离。 是基因操作中常用的重要方法。 水平电泳槽图片 垂直电泳 作用：用于分离蛋白质和寡糖核苷酸。 作用原理 聚丙烯酰胺凝胶为网状结构，具有分子筛效应。它有两种形式：非变性聚丙烯酰胺凝胶及SDS-聚丙烯酰胺凝胶（SDS）；非变性聚丙烯酰胺凝胶，在电泳的过程中，蛋白质能够保持完整状态，并依据蛋白质的分子量大小、蛋白质的形状及其所附带的电荷量而逐渐呈梯度分开。 垂直电泳槽图片 湿转电泳 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移至固相膜上，再用标记的抗体或二抗与之反应，以显示膜上特定的蛋白条带。 整个电泳过程完全浸在缓冲液中完成的称为湿转电泳 湿转电泳槽图片 半干转电泳 将混杂的蛋白质经聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后，转移至固相膜上，再用