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实验 46 逆境对植物的伤害（电导仪法） 一、原理 植物细胞膜对维持细胞的微环境和正常的代谢起着重要的作用。在正常情况下，细胞膜对物质具有选择透性能力。当植物受到逆境影响时，如高温、低温、干旱、盐渍或病原菌侵染后，细胞膜遭到破坏，膜透性增大，从而使细胞内的电解质外渗，以致植物细胞浸提液的电导率增大。膜透性增大的程度与逆境胁迫强度有关，也与植物抗逆性的强弱有关。这样，比较不同作物或同一作物不同品种在相同胁迫温度下膜透性的增大程度，即可比较作物间或品种间的抗逆性强弱，因此，电导法目前已成为作物抗性栽培、育种上鉴定植物抗逆性强弱的一个方法。 二、实验材料、试剂与仪器设备 （一）实验材料 植物叶片。 （二）试剂 NaCl 溶液。 （三）仪器设备 电导仪，天平，温箱，真空干燥器，抽气机，恒温水浴锅，注射器。 三、实验步骤 1. 制作标准曲线 如需定量测定透性变化，可用纯 NaCl 配成 0 、 10 、 20 、 40 、 60 、 80 、 100 μg/mL 的标准液，在 20 ～ 25 ℃恒温下用电导仪测定，可读出电导率。以电导率为纵坐标， NaCl 量为横坐标做标准曲线。 2. 选取小麦或其他植物在一定部位上生长叶龄相似的叶子若干，剪下后，先用纱布拭净，称取两份，各重 2 g 。 3. 一份插入小杯中放在 40 ℃恒温箱内萎蔫 0.5 ～ 1 h ，另一份插入水杯中放在室温下做对照。处理后分别用蒸馏水冲洗两次，并用洁净滤纸吸干。然后剪成长约 1 cm 小段放入小烧杯中（大小以能够容纳电极为度），并用玻棒或干净尼龙网压住，在杯中准确加入蒸馏水 20 mL ，浸没叶片。 4. 放入真空干燥器，用抽气机抽气 7 ～ 8 min 以抽出细胞间隙中的空气。重新缓缓放入空气，水即被压入组织中而使叶下沉。 5. 将抽过气的小烧杯取出，放在实验桌上静置 20 min ，然后用玻棒轻轻搅动叶片，在 20 ～ 25 ℃恒温下，用电导仪测定溶液电导率。 6. 测过电导率之后，再放入 100 ℃沸水浴中 15 min ，以杀死植物组织，取出放入自来水冷却 10 min ，在 20 ～ 25 ℃恒温下测其煮沸电导率。 四、结果计算 伤害率可以用下列三种形式表示： 1. 2. 3. ? .[ 注意事项 ] 1. 整个过程中，叶片接触的用具必须绝对洁净（全部器皿要洗净），也不要用手直接接触叶片，以免污染。 2. 各处理和对照的待测液的体积要一样。 3. 测定后电极要清洗干净。 ? [ 思考题 ] 植物抗逆性与细胞膜透性有何关系 ? 用电导仪法定量测定细胞膜透性变化为什么要用纯 NaCl 做标准曲线 ? ? 【附注】 DDS-11A 型电导率仪的使用方法 1 ．未打开电源开关之前，电表指针应指零；否则，应调整表头螺丝使指针指零。 2 ．打开电源开关，指示灯即亮，预热至指针稳定为止。 3 ．把开关拨至“校正”挡，调节“调正”旋钮使指针停在最大刻度。 4 ．当被测物的电导率低于 300 μS/cm 时，将开关拨向“低周”；当被测物的电导率为 300 ～ 10 3 μS ／ cm 时，将开关拨向“高周”。 5 ．将量程开关打到所需范围。若初测不知测量范围大小，应先将量程开关打到最大位置，然后逐格下降，以防过载，否则指针迅速摆动时易被打弯。 6 ．将电极插入电极插口内，旋紧插口上的紧固螺丝，同时把电极常数调节器调节在与之配用的电极常数相应的位置上。（测量范围在 10 ～ 10 4 μS/cm 时，使用 DJS-I 型铂黑电极；当被测物的电导率大于 10 4 μS ／ cm 时，则应选用 DJS-10 型铂黑电极，这时应调节在与之所配用电极常数 1/10 的位置上，例如：电极常数为 9.8 ，则应调节在 0.98 位置上，但要将测得的读数乘以 10 ，即为被测液的电导率）。 7 ．将电极完全浸入待测液中，把开关打到“测量”挡，从电表读数乘以量程开关所指的倍数（量程开关指红色时，读表中的红色数字；指黑色时则读黑色数字），即为被测溶液的电导率。 8 ．每测完一个样品，必须用蒸馏水冲洗电极，然后用滤纸吸干水珠，再测另一个样品。