灰色链轮丝菌产转谷氨酰胺酶发酵条件的优化.pdfVIP

维普资讯 92 2003,VoL24,No．9 晨蝠帚番芈 ※工艺技术 灰色链轮丝菌产转谷氨酰胺酶发酵条件的优化 陈义华，陆兆新，尤 华 (南京农业大学食品科技学院，南京 210095) 摘 要：以诱变后的灰色链轮丝菌L一18’作为研究对象，对它的摇瓶液体发酵条件进行优化得到其液体发酵的最佳 条件为：以48h种龄的种予液接种 1％液体发酵培养基，在 30~C、pH为7．5条件下发酵；培养基的组成为0．8％甘 油、0．4％胰蛋白胨、0．6％酵母膏、100×106CaC12、500×106K2HPO4、0．1％Tween40。发酵液转谷氨酰 胺酶活由0．962U／ml提高到 1．623U／ml。 关健词 ：灰色链轮丝菌 ；转谷氨酰胺酶 ；发酵条件 Abstract：TheeffectsofvariousfactorstoproduceoftransglutaminasebyL一18’werl~studied．Onthebaseofsinglefactor experim~ts，theoptimum conditionsforliquidfermentationwerefoundtobe：pH 7．5，30℃，hteproperstarterage48hoursand 哪 crinoculatingm ount1％(v／v)．Thecomponentsofmediumwere：0．8％glycerol，0．4％tryptone，0．6％yeastextract,100× 1 CaCh，500 × 1 K2HPO4，and0．1％Tw~n40．Thetransglutaminaseactivityreachde 1．623U／m1． Keywords：Streptorerticillium griseoverticillatum L一18’：transglutaminase；fermentationconditions 中图分类号：TS201。3 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2003)09—0092-03 食品蛋 白质是人体必需 的营养素之一 ，并对 菌种 诱变菌株灰色链轮丝菌L．18’。 食品的质地 ，可塑性等起决 定性作用 。改 良食 品 种子培养基 水 100ml、聚蛋 白胨 0．2g、酵母 中的蛋 白质可 以改善其凝胶性 ，乳化性 ，粘度 ， 膏 lg、葡萄糖 O．5g。K2I-IPO4O．2g、MgS040．1g。 气泡性等物理性质 。历年来，在利用酶改 良蛋 白 1．2 仪器 质性质方面 己进 行 了许 多研 究 ．转谷氨酰胺酶 DH2一D 冷冻恒温振荡器 ；722S分光光度计 ； (Transglutaminase。TG)也是可利用的改 良蛋 白性 ORILON-pH计 。 质 酶的一种l1～3】。 1．3 主要试剂 五十年代末，Waelsh等从豚 鼠中提取到有活性 Iris一乙酸 pH6．0；CBZ-GlnGlysigma化学公司 。 的转谷胺酰胺酶l钔。经过进一步研究发现TG是一种 1．4 酶活测定方法 Ca2+一依赖型酶，主要催化一个转酰胺基反应。然而 N．苄酯基 ．L一谷氨酰甘氨酸比色法。 从动物中提取的TG量少且价格昂贵，难 以大规模地 酶活单位(1U)定义为在 37℃、pH=6．0的条件下， 应用于实际生产 。1989年， 日本学者Ando等经过 1min内催化生成 1umol氧肟酸的酶量I61。 大量筛选，终于从链轮丝菌属(打epfoverficffff“m， 2 结果与分析 Sty．)中提取到了微生物来源 的MTG1(Microbial transglutaminase，MTG)。这是一种非Ca ．依赖型 经过单因子实验 ，确定灰色链轮丝菌L．18’产 酶，功能与TG很相似。它能催化几种蛋白分子间 转谷氨酰胺酶的较适宜发酵条件是：在初始 pH为 交联