第十一章 遗传的分子基础.pptVIP

湖北大学生命科学学院 陈建国 第十一章 遗传的分子基础 第一节 DNA作为主要遗传物质的证据 第二节 核酸的化学结构与DNA复制 *第三节 遗传信息的表达与调控 第四节 基因的概念与发展 第五节 基因突变的分子机制 第六节 遗传工程 第一节 DNA作为主要遗传物质的证据 一、 DNA是遗传物质的间接证据 二、 DNA是遗传物质的直接证据 (一)、 细菌转化试验 (二)、 噬菌体侵染与繁殖试验 (三)、 烟草花叶病毒拆合实验 *三、非核酸类的遗传物质 一、 DNA是遗传物质的间接证据 1. DNA含量的恒定性； 2. DNA代谢的稳定性； 3. 基因突变与紫外线诱变波长的关系。 (二)、 噬菌体侵染与繁殖试验 1. 背景知识 噬菌体侵染与繁殖基本过程： T2噬菌体浸染大肠杆菌后，遗传物质进入细菌细胞； 利用大肠杆菌的遗传复制系统复制噬菌体遗传物质； 利用大肠杆菌的遗传信息表达系统合成噬菌体组件； 最后组装形成完整的T2噬菌体。 因此只要弄清侵染时进入细菌的是噬菌体的哪一部分，就可能证明哪种物质是遗传信息的载体。 另外： P是DNA的组成部分，但不存在于蛋白质中； S存在于蛋白质中，但DNA中没有。 2. Hershey和Chase的实验 结果与结论 试验结果表明： 主要是由于DNA进入细胞内才产生完整的噬菌体； 结论：DNA才是(噬菌体的)遗传物质。 题外话： 与Avery等人研究比较，本试验的精度低得多。但是由于放射性标记法(也称为示踪原子法)，当时为人们普遍采用； 同时由于核酸研究及其它相关的成果，本试验结果很快得到人们的广泛认同。 (三)、 烟草花叶病毒拆合试验 烟草花叶病毒(TMV)是由RNA与蛋白质构成的管状微粒： 中心是单链螺旋RNA、外部是蛋白质外壳。 1. 拆分感染试验： 将TMV的RNA与蛋白质分离、提纯； 分别接种烟叶，发现RNA能使烟叶致病，而蛋白质不能； 用RNA酶处理RNA后接种烟叶也不能致病，表明RNA可能就是TMV的遗传物质。 2. 重组合试验 Frankel-Conrat, Singer (1956)进行了图示试验： 综上所述：到上世纪中期，多方面证据都直接或间接地表明DNA是主要的遗传物质，而在缺乏DNA的某些病毒中RNA就是遗传物质。 第二节 核酸的化学结构与DNA复制 *一、早期对核酸化学性质的研究 二、DNA的一级结构 三、DNA的二级结构 *四、RNA的分子结构 *五、DNA的复制 *一、早期对核酸化学性质的研究 虽然上世纪中才认识到DNA的生物学功能，核酸研究却已有一百多年历史： F.Mischer(1869)从外科绷带上脓细胞核中分离出一种不同于蛋白质的物质，含磷量高、并具有很强的酸性。他将这种物质称核质(素)(nuclein)； A.Kossel(1879)发现酵母等核质具有A、G、T、C四种碱基； R.Altamm(1889)将核素命名为核酸(nucleic acid)。 Kossel(1901)又发现核酸中具有碳水化合物(糖)； P.A.T.Levene(1909)研究表明：酵母核酸含有五碳糖——核糖； Fisher(1914)人工合成核苷酸； P.A.T.Levene(1929)又发现动物胸腺细胞核酸含有脱氧核糖. Levene将前者命名为核糖核酸(ribonucleicacid, RNA)，后者命名为脱氧核糖核酸(deoxy-ribonucleicacid, DNA)。并指出动、植物中均存在这两种核酸。 二、 核酸的一级结构 关于碱基的种类、分子式、核苷酸的种类、结构等内容是生物化学中讨论的内容，请课后复习。 在此谈三个关于核酸一级结构的内容： (一)、 “四核苷酸”假说； (二)、 查伽夫定则及其意义； *(三)、 核苷酸序列及其测定。 (一)、 “四核苷酸”假说 P.A.T.Levene(1930)提出“四核苷酸”假说，认为： 核苷酸是核酸的基本组成单位； 核酸是“磷酸—核糖(碱基)—磷酸”的核苷多聚体。 四核苷酸假说奠定了核酸化学基础。但同时认为： 核酸多聚体是由“四核苷酸结构”重复形成； 每个四核苷酸结构包含四种碱基各一个； 所以事实上认为在任何DNA中，四种碱基是等量的，DNA是四核苷酸结构的简单重复。 这种观念影响了人们对核酸生物学功能的进一步认识。 (二)、 查伽夫定则及其意义 E.Chargaff于1946-1950年根据纸层析、离子交换层析和紫外分光光度试验结果提出查伽夫定则： 四种碱基的数量不是等量的； 同一物种DNA碱基组成不变，而物种间则有很大不同； 嘌呤碱基总量与嘧啶碱基的总量(克分子总量)相等(A+G=T+C)，且A=T、G=C。 *(三)、 核苷酸序列及其测定 查伽夫定则表明：核酸并不是四核苷酸结构的简单重复，核酸的碱基