2014年高中生物人教版选修一精讲导学课件：专题2 课题2土壤中分解尿素的细菌的分离与计数（38ppt）[ 高考].pptVIP

* 课题2 土壤中分解尿素的细菌 的分离与计数 一、筛选菌株的思路 1.自然界中目的菌株的筛选： (1)依据：根据它对_________的要求，到相应的环境中去寻找。 (2)实例：PCR技术过程中用到的耐高温的______________，就 是从热泉中筛选出来的Taq细菌中分离出来的。 生存环境 Taq DNA聚合酶 2.实验室中目的菌株的筛选: (1)原理：人为提供有利于_________生长的条件(包括营养、 温度、pH等)，同时抑制或阻止其他微生物生长。 (2)方法：利用___________分离。 ①选择培养基：在微生物学中，将允许_____种类的微生物生 长，同时_____或_____其他种类微生物生长的培养基，称为选 择培养基。 ②选择分解尿素的细菌的培养基特点：_____是唯一氮源，按 物理性质归类为___________。 目的菌株 选择培养基 特定 抑制 阻止 尿素 固体培养基 二、统计菌落数目的方法和注意事项 1.常用方法：稀释涂布平板法。 (1)统计依据： ①当样品的_______足够高时，培养基表面生长的一个菌落， 来源于样品稀释液中的一个_____。 ②通过统计平板上的_______来推测样品中大约含有的活菌数。 稀释度 活菌 菌落数 (2)计算公式：每克样品中的菌株数=__________。 C：代表某一稀释度下平板上生长的___________。 V：代表涂布平板时所用的稀释液的_____。 M：代表_________。 (3)注意事项： ①一般选择菌落数在________的平板进行计数。 ②统计的菌落数往往比活菌的实际数目___。 ③统计结果一般用_______而不是用_______来表示。 ④设置对照：主要目的是排除实验组中___________对实验结 果的影响，提高实验结果的可信度。 (C÷V)×M 平均菌落数 体积 稀释倍数 30～300 低 菌落数 活菌数 非测试因素 2.其他方法 利用_______直接计数 滤膜法 显微镜 三、实验设计 1.土壤取样： (1)取样原因：土壤有“___________________”之称。同其他 生物环境相比，土壤中的微生物，数量_____，种类_____。 (2)土壤要求：富含_______，pH接近_____且潮湿。 (3)取样部位：距地表约___________的土壤层。 微生物的天然培养基 最大 最多 有机质 3 cm～8 cm 中性 2.样品稀释： (1)稀释原因：样品的_________直接影响平板上生长的_____ _____。 (2)稀释标准：选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获 得菌落数在________之间，便于计数。 (3)稀释倍数： ①测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105和106倍的稀释液 进行平板培养。 ②测定放线菌的数量，一般选用_____________倍稀释。 ③测定真菌的数量，一般选用_____________倍稀释。 稀释程度 菌落 数目 30～300 103、104和105 102、103和104 3.微生物的培养与观察： (1)培养：不同种类的微生物，往往需要不同的培养_____和培 养_____。 (2)观察：每隔_____统计一次_____数目，最后选取菌落数目 _____时的记录作为结果。 4.细菌的计数：当菌落数目稳定时，取同一_______下的3个平 板进行计数，求出_______，并根据所对应的_______计算出样 品中细菌的数目。 温度 时间 24 h 菌落 稳定 稀释度 平均值 稀释度 四、操作提示 1.无菌操作： (1)取土样的用具在使用前都需要_____。 (2)应在_____旁称取土壤，并在火焰附近将称好的土样倒入锥 形瓶中，塞好_____。 (3)在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在_____旁操作。 2.做好标记：本实验使用的平板和试管比较多。为避免混淆， 最好使用前就做好_____。 灭菌 火焰 棉塞 火焰 标记 3.制定计划：对于耗时较长的生物实验，要事先_________， 以便提高工作效率。 4.菌种鉴定：细菌合成的_____将尿素分解成___，使培养基的 碱性_____。在以_____为唯一氮源的培养基中加入_____指示 剂，培养某种细菌后，若指示剂变___，可初步鉴定该种细菌 能够分解尿素。 制定计划 脲酶 氨 增强 尿素 酚红 红 【思考辨析】 1.判断正误 (1)选择分解尿素的细菌的培养基为液体培养基。( ) 【分析】选择分解尿素的细菌的培养基为固体培养基，固体 培养基具有分离、鉴定作用。 (2)统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最 多的平板进行统计。( ) 【分析】统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数 在30～30