rlx微生物的实验室培养.docVIP

【学习目标】了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。 【学习重点】无菌技术的操作 【学习难点】无菌技术的操作 【课前预习导学】 一、基础知识 （一）培养基 1.培养基的种类包括 培养基和 培养基等。 2.培养基的化学成分一般都含有 、 、 、 四类营养成分。 3.在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对 、 _ 以及 等的要求。例如：培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加 ；培养细菌时需要将培养基的PH调至 ；培养厌氧微生物时需要提供无氧的条件。 （二）无菌技术 1.获得纯净培养物的关键是 。避免杂菌污染的方法主要包括以下四个内容：①对实验操作的 、操作者的衣着和手进行清洁和 。②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行 。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在__________________附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与_________________________相接触。 2.消毒和灭菌 （1）消毒是指使用____________________________________仅杀死物体表面或_________的部分微生物（不包括______和_______）。常用的消毒方法有 、 。此外，人们也常使用化学药剂进行消毒，如用 、 等。此外，实验室里还用 或 进行消毒。 （2）灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体__________的微生物，包括芽孢和孢子。常用的灭菌方法有 、 、 ， 二、实验操作 本实验用_________________________培养基进行大肠杆菌的纯化培养，可分成___________________和______________________两个阶段进行。 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 → → → →倒平板 2.纯化大肠杆菌 微生物接种的方法中最常用的是 和 。 （1）平板划线法是指接种环在琼脂固体培养基表面____________的操作，将聚集的菌种______________到培养基的表面。 (2)稀释涂布平板法是指将菌液进行一系列的__________，然后将不同________的菌液分别涂布在琼脂固体培养基的表面,进行培养。在稀释度 的菌液时，聚集在一起的微生物将被分散成_________________，从而能在培养基表面形成单个的________。 三、结果分析与评价 1.如果接种大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致，说明接种符合要求。 2.若培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中_____________未达到要求。 3.__________________的作为对照的培养基，在培养过程中出现了菌落，则说明培养基_______不彻底，实验失败。 四、菌种的保存 1.对于频繁使用的菌种，我们可以采用 法； 2.对于需要长期保存的菌种，可以采用 法。 探究一：有关“倒平板”操作 1.培养基灭菌后，需要冷却到500C左右，才能用来倒平板。你用什么方法来估计培养基的温度？ 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？ 探究 二：有关“平板划线法”操作 为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？