MPF的调控.docVIP

卵母细胞成熟过程MPF的调控和MPF的作用底物卵母细胞减数分裂从胎儿期开始，到出生前后停滞于第1次减数分裂前期(双线期)，青春期再恢复，最终停滞于第2次减数分裂中期(M期)，形成成熟卵母细胞。从减数分裂恢复到成熟卵母细胞的形成这个过程称为卵母细胞的成熟过程。近年的研究表明，多种信号途径参与调节卵母细胞成熟过程，其中成熟促进因子(maturation promoting factor,MPF)是调节卵母细胞成熟关键的信号分子，它介导着多种信号通路的生理功能可通过多种机制调节卵母细胞成熟，同时也受多种因子的调控。这样形成一套以MPF为中心的卵母细胞成熟调控网络。本文就MPF的调控因子和MPF的作用底物进行综述。 　　1? 卵母细胞成熟过程中MPF的调控??? 　　MPF是由调节亚基细胞周期蛋白cyclin B和催化亚基细胞周期蛋白依赖性激酶1(cyclindependent kinase1，CDK1，又可称为Cdc2)组成的复合体，其中，cdc2负责MPF的丝氨酸/苏氨酸(serine/threonine,Ser/Thr)蛋白激酶活性；cyclin B是MPF的调节单位，其表达因细胞周期而变化，以此调节MPF的活性。在多种生物体中，生发泡期(germinal vesicle,GV)卵母细胞中就形成PreMPF，其没有活性，Cdc2蛋白上Thr14、Tyr15和Thr161 3个位点被磷酸化。Thr161位上磷酸化是MPF活性所必需的，而Thr14和Tyr15是抑制性磷酸化位点，只有这两残基上去磷酸化，MPF才能被激活。在减数分裂过程中，MPF的活化还需要Cyclin B蛋白的聚积，当该蛋白达到的阈浓度并呈合适磷酸化状态时，在其它多种调节信号的作用下，最终触发PreMPF的活化［1］。下面着重阐述几种直接调节MPF活性的信号分子。 　　1.1? Cdc25蛋白磷酸酶? Cdc25是1种重要的MPF生理激活剂，属于双向特异性蛋白磷酸酶，它直接使Cdc2蛋白上Thr14和Tyr15位去磷酸化来激活MPF。Cdc25磷酸酶包括3种亚型：Cdc25a、Cdc25b和Cdc25c，三者在细胞周期调控中都起着重要作用，其中Cdc25b和Cdc25c可调节减数分裂中MPF的活性。Cdc25蛋白上有多个磷酸化位点，其中Ser287位点属于抑制性位点，对调节Cdc25活性尤为重要。当该位点被磷酸化，Cdc25呈失活状态；磷酸化的Ser287位点可被1433蛋白识别，促进1433蛋白与Cdc25的结合，稳定Cdc25磷酸化和无活性状态。当Cdc25蛋白的激活性位点被磷酸化后，Cdc25被激活，同时这也促使Cdc25蛋白与1433蛋白的分离，使Ser287位点易于发生去磷酸化，这样进一步激活Cdc25［2］。??? 　　卵母细胞成熟过程中有多种因子调节着Cdc25的活性。Polo样激酶1(polo like kinase 1,Plk1)可直接磷酸化激活Cdc25。在非洲蟾蜍卵母细胞提取液中，活化的Plk1可激活Cdc25，同时MPF也发生活化，Plx1免疫耗竭会阻止Cdc25的活化［3］。值得注意的是：在G2/M转化期，cyclin B蛋白合成、Myt1(负调节MPF活性)活性下降和Cdc25的活化共同来激活MPF，活化的MPF活性又正向调节Plk1和Cdc25，形成正反馈循环，放大MPF激活效应［4］。另外，cAMP/cAMP依赖性蛋白激酶A(cAMPdependent protein kinase A,PKA)、Ca(2+)/钙调素依赖性蛋白激酶II(calmodulindependent protein kinase,CaMKII)等均可通过Cdc25来调节MPF的活性。CaMKII和PKA都可直接磷酸化Cdc25蛋白上抑制性位点Ser287，并促进Cdc25与1433蛋白的结合，抑制Cdc25的活化，以此阻断了MPF的激活［5，6］。所以Cdc25是其他信号通路与MPF发生联系的重要环节。 　　1.2? Wee 1蛋白激酶? Wee1属于Ser/Thr蛋白激酶，有Wee1A和Wee1B两种亚型。它可直接使Cdc2蛋白上的Tyr15位点发生磷酸化，抑制MPF的激活。在M期负调节因子Wee1促使MPF失活，促进细胞向后期相转化；正调节因子Cdc25可拮抗Wee1的作用，维持MPF的活性。2种因子共同作用的结果是MPF部分失去活性，这是卵母细胞M/MⅡ转化所必需的［7，8］。在非洲蟾蜍卵母细胞中，仅在M期检测到Wee1蛋白，而GV期和M期卵母细胞中均无Wee1蛋白存在，提示Wee1只在M/MⅡ转化过程中起作用。在M/MⅡ转化中，Wee1还可抑制DAN的合成，以此阻止细胞进入间期，形成减数分裂