创新性实验活动项目计划书-高畅.docVIP

北京大学医学部大学生创新性实验活动项目计划书 项目名称 磷酸酶DUSP5在炎性细胞因子产生中的作用及机制研究 项目创新特色概述(50字以内) 经费预算 5000 起止时间 2014 年5 月至 2015 年 4月 申请人或申请团队信息 姓名 性别 学号 所在系（部）、专业 身份证号 联系电话 E-mail 高畅 女 0822242Xanitagao@163.com 王颖 女 注：团队申请项目，请将项目负责学生的信息填写在本栏目的第一行。 导师信息 姓名 张君 性别 女 出生年月 1973年9月 所在院系 基础医学院 职称 副教授 职务 电话E-mail junzhang@ 二、项目方案 一、研究背景 在炎症发生发展的过程中，天然免疫细胞所产生的炎症因子的作用是非常重要的。而MAPK家族中的一些蛋白可以作为TLR介导的天然免疫反应的下游途径，促进细胞因子和炎性介质的产生。同时，其被激活的强度和持续时间决定着免疫反应的程度。近年来，研究人员在哺乳动物体内发现了一大类DUSP（dual specificity phosphatase）家族基因，其中绝大多数可以作为MAPK的磷酸酶。因此，DUSP家族作为调节MAPK信号的分子，可以通过控制其表达来调节免疫反应的程度。 在今年来的研究过程中，DUSP1，DUSP2，DUSP10等基因在免疫反应中的作用正在逐渐明晰。但在DUSP基因家族中的其他基因的作用仍不清楚。本实验中，选取DUSP5基因进行研究，这是因为在DUSP家族中的基因绝大多数都属于第二型基因，特定的MKB结构域使得其作为磷酸酶的作用更加明显，因此第二型的基因对于各种刺激的表达量变化会更加明显，而DUSP5基因则正是属于第二型，同时，目前DUSP5在炎症反应中的作用还未有成果发表。 申请者自进入该研究组以来，积极了解炎症的相关知识，参与实验室的小实验，已经熟悉一些基本实验操作方法，具备了该项目所需要的一些实验能力，能够在预期时间内完成好本项目。 二、研究思路 1.在小鼠巨噬细胞和巨噬细胞系中对细胞进行不同的刺激，如TLR 的配体如LPS，poly(I:C) ,CpG等，以及生长因子，热休克蛋白刺激等，观察是否可以上调巨噬细胞 2.在小鼠巨噬细胞和巨噬细胞系中对DUSP5基因进行过表达或基因敲低，观察刺激剂诱导后的炎性细胞因子水平是否有变化。 3.在巨噬细胞系中，研究过表达或基因巨噬细胞基因转染， Blot等 四、经费使用计划 实验业务费：(包括实验所用培养基、血清、抗体等试剂以及培养瓶、培养板、枪头等耗材等） 4000.00元 其他包括文献检索费、论文发表费等合计：1000元。 三、预期成果: 熟悉掌握上述免疫学、分子生物学实验方法，培养良好的科研思维，并初步阐明DUSP5在炎性细胞因子产生中的作用，为减轻、控制炎症反应提供一定的理论依据。 说明：本表直接发e-mail至pinggubjmu@，由医学部管理部门保存。