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正相、反相和极性胶联柱使用手册 Chrompack HPLC Normal-,Reversed phase and Polar bonded columns 注意 此色谱柱填充的是改性硅胶材料。向柱内导入碱性溶剂（pH7.0）或酸性溶剂（pH2.0）会导致柱子损坏。在使用这个柱子之前，你要充分地熟悉这本手册讲述的内容。未正确地使用不能享受保修待遇。 简介 此Chromguard High Efficiency（高效）柱(10X3.0mm) 或High Capacity（高容量）柱(50X3.0mm)。 进样量和浓度 柱子的最大载样量取决于：柱子的型号，使用的条件和样品的类型。很难给出一个一般的指示。对于进样体积的建议则比较容易（见表中的典型值）。 注射了太大体积或太浓的样品会使峰展宽或者峰融合。 柱尺寸 长度*内径 最大样品体积 250×2.0mm ±10μl 200×3.0mm ±15μl 250×4.6mm ±50μl 250×10.0mm ±250μl 温度 HPLC柱最好在柱温箱中使用。重复性取决于温度控制。最佳的温度与特定的应用有关。温度影响洗脱液流动的线速度。在使用ChromSep玻璃柱的时候，一定要调节流速使压力保持在3000psi以下。 贮存 一定不要在柱子内充满缓冲液或者其他含盐类的洗脱液的情况下贮存色谱柱。 贮存溶剂应当含有至少20%的有机溶剂，以防止有细菌的生长。 柱效损失的可能原因 额外的峰展宽。当使用小直径或者长度较短的柱子时，峰展宽的情况可能比较明显。要保证管路的长度和内径都保持最小。检查进样体积和检测器检查池体积是否适用于柱体积。 洗脱的平衡时间不够。 不正确柱温。 不正确的修正浓度。 床压缩。使用了过大的洗脱流速。将柱子反向，使用低流速。 11.柱效丧失和/或高背压 颗粒物积聚在烧结物或者树脂床上（它们都会使背压增高）。如果柱压增高了，将柱子与进样器断开，运行泵，以验证背压的来源确实是来自柱子的颗粒污染（样品、洗脱液和系统）。倒转柱子，以反向的流动来冲洗柱子。如果这样不能解决问题，更换进口过滤器或者筛板。 微生物在洗脱液中生长。倒转柱子，尝试以反向的流动来将污染物冲洗出柱子。更换进口过滤器或者筛板。 有蛋白质脂肪，油脂污染或者极性化合物等污染。再生柱子（见第12节）。 12.再生 再生反相色谱柱 首先倒转柱子。 以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟，使用的溶剂的顺序要按照水—甲醇—异丙醇—二氯甲烷—异丙醇—甲醇—水进行。 柱子转回正常方向，使用分析所用洗脱液平衡。 注意：在使用另外的淋洗方法的时候，一定要先用水开始冲洗以去除缓冲液，保证其后的洗脱液可以混溶。 再生硅胶柱 首先倒转柱子。 以大约最佳流速的40%的流速冲洗柱子大约45-60分钟，使用的溶剂的顺序要按照异辛烷（或己烷）—乙酸乙酯—干燥的异辛烷（或己烷）进行。 柱子转回正常方向，使用分析所用洗脱液平衡。 3.再生极性键合柱 取决于使用的条件，可以使用反相的条件，也可以使用硅胶柱的条件。 注意：绝对不要使用酮类或醛类冲洗氨基柱，因为可能与固定相发生反应。四氢呋喃作为替代可以使用。 以上内容由美国瓦里安技术中国有限公司北京办事处李华译自随柱附带的操作手册。 2002年5月16日