Chapter 10 Molecular Luminescence Analysis.pptVIP

解释2：位能曲线(Frank-Condon原理) 由于电子吸收跃迁速率极快(10-15s)，此时核的相对位置可视为不变(核较重)。当两个能层间吸收跃迁的几率越大，其相反跃迁的几率也越大，即产生的光谱呈镜像对称。 图5.5 位能曲线 三、荧光仪器(光源与检测器处于相互垂直的位置) 第一单色器 或滤光片 记录仪 第二单色器 或滤光片 荧光 光源 激发 样品池 1)光源： 氙灯、高压汞灯、激光； 2)样品池：石英(低荧光材料)，形状以四面透光、方形和长方形为宜； 3)两个单色器：选择激发光单色器,分离荧光单色器； 4)检测器：光电倍增管。 图5.6 荧光分析仪器示意图 * 四 荧光分析法的应用 该式只有当A0.05时才成立,即荧光测定必须在极稀的溶液中才可用于定量测定,否则较正曲线发生弯曲. * (一)无机化合物的分析 大多数无机离子与溶剂之间的相互作用很强，其激发态多以非辐射跃迁方式返回基态,发荧光者甚少。然而很多无机离子可以与一些有机化合物形成有荧光的络合物，利用这一性质可对其进行荧光测定。能够同金属离子形成荧光络合物的有机试剂绝大多数是芳香族化合物，通常含有两个或两个以上的官能团,能与金属离子形成五元环或六元环的螯合物。由于螯合物的生成,分子的刚性平面结构增大，使原来不发荧光或荧光较弱的化合物转变为强荧光化合物。 另一类络合物是三元离子缔合物。 * (二)有机化合物的分析 脂肪族有机化合物的分子结构较为简单,本身能发生荧光的很少，一般需要与某些试剂反应后才能进行荧光分析。如：丙三醇与苯胺在浓硫酸介质中反应生成发射蓝色荧光的喹啉，据此可以测定0.1~2μg?mL-1的丙三醇。 芳香族化合物因具有共轭的不饱和体系，多数能发生荧光,可直接用荧光法测定. * 第二节 磷光分析 一、概述 磷光分析法是以分子磷光光谱来鉴别有机化合物和进行定量分析的一种方法。 磷光分析法在药物分析，临床分析等领域的应用日益发展。 二、 基本原理 (一) 磷光的产生和磷光强度 磷光是处于激发三重态的分子跃迁返回基态时所产生的辐射。 1. 磷光的特点： ? 磷光波长比荧光的长(T1S1)； ? 磷光寿命比荧光的长(磷光为禁阻跃迁产生，速率常数小)； ? 磷光寿命和强度对重原子和氧敏感(自旋轨道耦合，使KISC增加)。 * 2. 磷光强度: IP=2.3?PI0kbc 式中，IP为磷光强度，?P为磷光效率，I0为激发光的强度，k为磷光物质的摩尔吸收系数 ， b为试样池的光程，C 为磷光物质的浓度。 在一定的条件下，?p、Ip 、k、b 均为常数，因此上式可写成： Ip=Kc * (二) 温度对磷光强度的影响 1. 随着温度降低,分子热运动速率减慢,磷光逐渐增强. 2. 低温磷光(液氮) 由于磷光寿命长，T1的非辐射跃迁(内转换)几率增加，碰撞失活(振动弛豫)的几率、光化学反应几率都增加，从而降低磷光强度。因此有必要在低温下测量磷光。同时要求溶剂： ?易提纯且在分析波长区无强吸收和发射；? 低温下形成具有足够粘度的透明的刚性玻璃体。 常用的溶剂： ? EPA——乙醇+异戊烷+二乙醚(2+2+5) ? IEPA——CH3I+EPA(1+10)。 * (三)重原子效应 使用含有重原子的溶剂(碘乙烷、溴乙烷)或在磷光物质中引入重原子取代基，都可以提高磷光物质的磷光强度,这种效应称为重原子效应。前者称为外部重原子效应,后者称为内部重原子效应。 机理:重原子的高核电荷使得磷光分子的电子能级交错，容易引起或增强磷光分子的自旋轨道偶合作用,从而使S1→T1的体系间窜跃概率增大，有利于增大磷光效率。 * (四) 室温磷光 低温磷光需低温实验装置且受到溶剂选择的限制，1974年后发展了室温磷光(RTP)。 1)固体基质：在室温下以固体基质(如纤维素等)吸附磷光体，可增加分子刚性、减少三重态猝灭等非辐射跃迁，从而提高磷光量子效率。 2)胶束增稳：利用表面活性剂在临界浓度形成具多相性的胶束， 改变磷光体的微环境、增加定向约束力，从而减小内转换和碰撞等去活化的几率，提高三重态的稳定性。 利用胶束增稳、重原子效应和溶液除氧是该法的三要素。 * (五) 敏化磷光：其过程可以简单表示为： (六)磷光发射 从单重态到三重态分子间发生系间跨跃跃迁后，再经振动弛豫回