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RNA生物合成和加工 遗传信息传递的 中心法则 第一节 DNA指导下RNA的合成 大肠杆菌RNA聚合酶（456 kD) RNA合成过程 2.启动子和转录因子 足迹法确定启动子序列 大肠杆菌启动子共有序列 3. 终止子和终止因子 大肠杆菌两类终止子的回文结构 第二节 RNA转录后的加工 tRNA前体分子的加工 3. RNA的拼接、编辑和再编码 RNA的拼接方式 RNA编辑的不同类型和分布 RNA的再编码 在正常情况下，mRNA的三联体密码子可以被的反密码子识别， mRNA携带的遗传信息得以正确表达，但是，基因的错义、无义和移码突变，改变了编码信息，使得蛋白质的活性降低或丧失。 校正tRNA通常是一些变异的tRNA，它们或是反密码子环碱基发生改变，或是决定特异性即个别碱基发生变化，从而改变了译码规则，故而使错误的编码信息受到校正。 这是mRNA再编码的一种重要方式。 4. RNA生物功能的多样性 5.RNA的降解 二.RNA的逆转录作用 逆转录过程 逆逆转录病毒的生活周期 RNA在遗传信息的翻译中起着决定作用。 RNA具有重要的催化功能和其它持家功能。 RNA转录后加工和修饰依赖于各类小RNA和其它蛋 白质复合物。 RNA对基因表达和细胞功能具有重要调节作用。 RNA在生物进化中起重要作用。 RNA降解是涉及到基因表达的一个重要环节。 rRNA和tRNA是稳定的RNA ，其更新率低； mRNA是不稳定的RNA，其更新率非常高。因为mRNA与其编码基因的表达活性直接有关，不同的RNA需要以不同的速度进行降解。脊椎动物细胞mRNA的平均半衰期约为3 h, 细胞每一世代中各类mRNA约周转10次。细菌mRNA的半衰期大约只有1.5min，以适应快速生长和对环境作出快速反应的要求。 所有细胞中都存在各种核糖核酸酶，可以降解RNA。真核生物mRNA降解的主要途径首先是poly(A)尾巴的缩短，去腺苷酸化能诱发脱去5?端帽子结构，然后由5?→3?方向和3?→5? 方向降解mRNA。 第三节 RNA指导下的RNA和DNA的合成 以RNA为模板合成RNA ，是病毒RNA的特殊繁殖方式。有实验指出，当病毒RNA侵入寄主细胞后，这些病毒在RNA复制酶催化下即可自行复制产生新的病毒RNA。 RNA复制酶需要专一性的RNA模板，例如Qβ噬菌体的RNA复制酶只能用Qβ病毒RNA为模板，它不用寄主的RNA为模板。 一.RNA的复制 1. 噬菌体QβRNA的复制 噬菌体Qβ：直径20nm的正十二面体，含30% RNA，其余为蛋白质，单链RNA，4500个核苷酸，编码3-4个蛋白质。 结构：5’端—成熟蛋白（A或A2蛋白）—外壳蛋白 （或A1蛋白）—复制酶β亚基—3’端 Qβ复制酶：αβγδ四个亚基，只有β是自己编码，其余三个亚基来自寄主细胞。 ? 进入E.coli细胞后，其RNA即为mRNA，可以直接合成与病毒繁殖有关的蛋白质（复制酶β亚基）。 QβRNA为正链RNA 原核tRNA前体的加工 E.coli染色体基因组有60个tRNA基因，即某种a.a. 的tRNA基因不止一个拷贝。tRNA基因大多成簇存在， 或与rRNA基因，或与蛋白质基因组成混合转录单位。 tRNA前体加工步骤： 核酸内切酶(RNaseP、RNaseF)在tRNA两端切断。 核酸外切酶(RNaseD)从3’端逐个切去附加序列。 在tRNA3’端加上-CCA-OH。 核苷的修饰（修饰酶):甲基化酶/S-腺苷蛋氨酸（SAM），假尿苷合成酶。 a、切除tRNA前体两端多余的序列： 5’—端切除几到10个核苷酸。 b、末端添加：3’-端添加CCA序列。 c、修饰：形成稀有碱基如DH2 。 RNaseP RNaseF RNaseP RNaseF RNaseD RNaseD ACC ? ? ? 表示核酸内切酶的作用 表示核苷酸转移酶的作用 表示核酸外切酶的作用 表示异构化酶的作用 5’ 3’ tRNA+CTP tRNA-C+PPi tRNA-C+CTP tRNA-CC+Ppi tRNA-CC+ATP tRNA-CCA+PPi tRNA核苷酰转移酶 tRNA+SAM 甲基-tRNA+S-腺苷高半胱氨酸 tRNA甲基化酶 tRNA假尿苷合成酶催化尿苷的糖苷键发生位移 反应，由尿苷的N1变为C5。 2. 真核生物RNA的加工 真核rRNA、tRNA前体的加工过程与原核的很相似，但mRNA的加工过程与原核的有很大不同。 真核rRNA前体的加工 真核生物核糖体 小亚基含：16-18