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分子克隆技术在热带作物中的应用 摘要：分子克隆技术在热带作物中主要用于建立基因文库、分离高产和抗性基因、基因重组选择适当受体和载体以及异源基因的导入等。在热带作物品种鉴定、资源保护以及繁殖育种中起到了重要的作用。 关键词：分子克隆；热带作物 分子克隆技术也称为基因克隆技术,包括把来自不同生物的基因同有与自主复制能力的载体DNA在体外人工连接,构建成新的重组DNA,然后送入受体生物中去表达,从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。热带作物是热带地区的栽培植物，是适于热带地区栽培的各类经济作物的总称。橡胶；油料作物：油棕、椰子、腰果；香料作物：胡椒、香茅、香根、罗勒；纤维作物：龙舌兰科麻类、番麻、蕉麻、爪哇木棉；饮料作物：咖啡、可可；药材：砂仁、巴戟、槟榔、三七；热带水果：香蕉、荔枝、龙眼、菠萝、芒果、油梨、番瓜、番石榴等。橡胶分为天然橡胶和合成橡胶。天然橡胶主要来源于三叶橡胶树，[15-16]，但迄今尚未见P450基因转化菠萝等果树的研究报道．何业华[17]等在根癌农杆菌介导CYP1A1转化菠萝的研究中以菠萝愈伤组织为受体，获得了转CYP1A1的转基因菠萝植株，旨在以该基因提高菠萝对本身及土壤中残留农药等POPs的降解能力。 5、番木瓜 番木瓜(Carica papaya Linnaeus)也称木瓜、万寿果,是热带亚热带多年生草本植物。我国广东、广西、福建、海南、云南和台湾都有种植。对番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因(PRSV-CP)的分离和转基因工作始于80年代后期、90年代初期，目前在基因的分离克隆、转基因番木瓜进入大田的抗病试验等方面已取得了突破性的进展，但对基因表达与抗病性关系方面却研究得不多，周鹏等通过质粒的提取、RNA斑点杂交和间接斑点ELISA等技术估测了转基因番木瓜中mRNA、蛋白质的表达量，进而检测它们与抗病能力的关系，以、揭示了PRSV-CP转基因番木瓜表达水平与抗病能力的内在联系[18]。 6、木薯 木薯是三大薯类作物之一，全球第六大粮食作物，被誉为“淀粉之王”，是世界６亿人口赖以生存的食粮。由于我国人多地少，木薯作为一种单位面积产量较高的潜在粮食作物和生物能源，其生产对于我国的粮食稳定和生物能源的发展有重要意义。首届中国（博鳌）农业科技创新论坛上获悉，中国热带农业科学院仅用１年的时间，已经完成３个木薯品种的基因组深度测序，同时采用几种超高通量测序技术，综合组装获得较完整的基因组草图，基因组精细图的完成能够阐明木薯基因组结构的基本特征，有利于进行基因定位和基因调控，同时可以利用一些重要的基因来改良木薯品种，为木薯产业提供高产、稳产和综合利用的新品种。[4]Arokiaraj P,Jones H,Cheong K F,et al.Gene insertion into Heveabrasiliensis[J].Plant Cell Rep,1994,13:425-431. [5]Arokiaraj P,Yeang H Y,Cheong K F,et al.CaMV 35S promoterdirectsβ-glucuronidase expression in the laticiferous system of transgenic Hevea brasiliensis(rubber tree)[J].Plant Cell Rep,1998,17:621-625. [6]Montoro P,Teinseree N,Rattana W,et al.Effect of exogenous calcium on Agrobacterium tumefaciens-mediated gene transfer in Hevea brasiliensis(rubber tree)friable calli[J].Plant Cell Rep,2000,19:851-855. [7]王颖，陈雄庭.基因枪法将GAI基因导入巴西橡胶的研究[J].热带亚热带植物学报，2006，14(3)：179-182 [8]赵健生.槟榔黄化病的调查报告[J].热带作物科技，1985（1）：64-49. [9]俞浩，冯淑芬，郑建华.海南岛槟榔“黄化病”问题调查报告[J].热带农业科学，1986（3）：45-49. [10]金开璇，孙福生，陈慕容等.槟榔黄化病的病原的研究初报[J].林业科学，1995，31（6）：556-559. [11]罗大全.海南槟榔黄化病研究现状[J].世界热带农业信息，2007（6）：24-26. [12]车海彦.海南槟榔黄化病病原物的分子鉴定[J].热带作物学报，2010.31（1）：83-87 [13]贺竹梅，李宝健. 香蕉生物技术研究现状与展望[J].生物工程进展，1997,17,（5）：19-21 [14]杜道