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第一章 色谱分析法概论 第一节 概 述 色谱分析法简称色谱法或层析法(chromatography)，50年中，由于气相色谱法、高效液相色谱法及薄层扫描法的飞速发展，而形成一门专门的科学——色谱学。色谱法已广泛应用于各个领域，成为多组分混合物的最重要的分析方法，在各学科中起着重要作用。历史上曾有两次诺贝尔化学奖是授予色谱研究工作者的：1948年瑞典科学家Tiselins因电泳和吸附分析的研究而获奖，1952年英国的Martin和Synge因发展了分配色谱而获奖；此外在1937～l972年期间有12次诺贝尔奖的研究中， 色谱法创始于20世纪初，1906年俄国植物学家Tsweet将碳酸钙放在竖立的玻璃管中，，，(stationary phase)，(mobile phase)。随着其不断发展，，”已失去原有意义， 30与40年代相继出现了薄层色谱法与纸色谱法。50年代气相色谱法兴起，”分析的新水平，，l9560年代推出了气相色谱—质谱联用技术(GC-MS)，70年代高效液相色谱法(HPLC)的崛起，，80年代初出现了超临界流体色谱法(SFC)，GC与HPLC的某些优点。80年代末飞速发展起来的高效毛细管电泳法(high performance capillary electrophoresis， HPCE)，，l07m-1。该法对于生物大分子的分离具有独特优点。 色谱法的分离原理主要是利用物质在流动相与固定相之间的分配系数差异而实现分离。色谱法与光谱法的主要区别在于色谱法具有分离及分析两种功能，，， 色谱法可从不同的角度进行分类： 1.按流动相与固定相的分子聚集状态分类 在色谱法中流动相可以是气体、液体和超临界流体，(gas chromatography， GC)(liquid chromatography， LC)(supercritical fluid chromatography， SFC)(如吸附剂)或液体，-固色谱法(GSC)与气-液色谱法(GLC)；液相色谱法又可分为液-固色谱法(LSC)及液-液色谱法(LLC)。 2.按操作形式分类 可分为柱色谱法、平板色谱法、电泳法等类别。 柱色谱法(column chromatography)是将固定相装于柱管内构成色谱柱，，(packed column)色谱法、毛细管柱(capillary column)色谱法及微填充柱(microbore packed column)色谱法等类别。气相色谱法、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography， HPLC) 平板色谱法(planar或plane chromatography)是色谱过程在固定相构成的平面状层内进行的色谱法。又分为纸色谱法(paper chromatography； )、薄层色谱法(thin layer chromatography， TLC，)及薄膜色谱法(thin film chromatography；)等， 毛细管电泳法(capillary electrophoresis，CE)， 3.按色谱过程的分离机制分类 可分为分配色谱法(partition chromatography)、吸附色谱法(adsorption chromatography)、离子交换色谱法(ion exchange chromatography，IEC)(steric exclusion chromatography，SEC)(affinity chromatography)等类型。 色谱法简单分类如下表: 第二节 色谱法的基本原理 一、色谱过程 色谱过程是物质分子在相对运动的两相间分配“平衡”的过程。混合物中，(distribution coefficient)不等，， 吸附柱色谱法的操作及色谱过程如图18-l 所示。把含有A、B两组分的样品加到色谱柱的顶端，AB均被吸附到固定相上。然后用适当的流动相冲洗，，，，，，，，，，B先从色谱柱中流出，A后流出色谱柱， 二、基本类型色谱法的分离机制 1.分配色谱法 分配色谱法利用被分离组分在固定相或流动相中的溶解度差别而实现分离。其固定相为液体，GLCLLC都属于分配色谱法范围。 分配色谱法的示意图如图18-2。图中X代表样品中某组分(溶质)分子，m与s分别为流动相与固定相。溶于流动相与溶于固定相的溶质分子处于动态平衡，(严格应为活度比)为狭义分配系数(partition coefficient): (1.1) 溶质分子在固定相中溶解度越大，，K越大。在LLC中K主要与流动相的性质(种类与极性)有关，GLC中K与固定相极性和柱温有关。 2.吸附色谱法 吸附色谱法利用被分离组分对固体表面活性吸附中心吸附能力的差