紫外分光光度法测定水样中的苯酚.pptVIP

一、实验目的 学习紫外吸收光谱法的基本原理； 了解紫外分光光度计的基本结构及其操作方法； 掌握等吸光度法消除干扰的原理和方法。 Lamber-Beer定律：吸收光谱法基本定律 三、仪器结构 1．光源： 3．吸收池： 玻璃——能吸收UV光，仅适用于可见光区 石英——不能吸收紫外光，适用于紫外和可见光区 要求：匹配性（对光的吸收和反射应一致） 四、定量分析方法 2．两组分吸收光谱部分重叠 λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测Ca λ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测Cb 3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定 （1）解线性方程组法 （2）等吸收双波长消去法 （1）解线性方程组法 步骤： （2）等吸收双波长法 步骤： 消除a的影响测b 消去b的影响测a 注：须满足两个基本条件 选定的两个波长下干扰组分具有等吸收点 选定的两个波长下待测物的吸光度差值应足够大 * * 紫外-可见分光光度法 三氯苯酚存在时苯酚含量的测定 图1 物质对光的吸收 描述物质对单色光吸收强弱与液层厚度和待测物浓度的关系 假设一束平行单色光通过一个吸光物体 二、基本原理 图2 756CRT紫外分光光度计 钨灯或卤钨灯——可见光源 350~1000nm 氢灯或氘灯——紫外光源 200~360nm 2．单色器：包括狭缝、准直镜、色散元件 棱镜——对不同波长的光折射率不同 色散元件 分出光波长不等距 光栅——衍射和干涉 分出光波长等距 光电池 光电管 光电倍增管 二极管阵列检测器 4．检测器：将光信号转变为电信号的装置 5．记录装置：讯号处理和显示系统 光源 单色器 样品池 检测器 记录装置 图3 分光光度计构造方框图 图4 单光束分光光度计基本结构示意图 特点： 使用时来回拉动吸收池 →移动误差 对光源要求高 比色池配对 特点： 不用拉动吸收池，可以减小移动误差 对光源要求不高 可以自动扫描吸收光谱 图5 双光束分光光度计结构示意图 特点： 利用吸光度差值定量 消除干扰和吸收池不匹配引起的误差 图6 双波长分光光度计结构示意图 多组分的定量方法 三种情况： 1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰） 两组分在各自λmax下不重叠→分别按单组分定量 * *