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Bordetella pertussis 百日咳博得式菌 報告人:林明莉 一、細菌特性: Bordetella pertussis是革蘭氏陰性球桿菌,在一般培養基不生長,要使用特別培養基如Bordet-Gengou agar或 Charcoal agar 培養, Bordetella pertussis 為小型、凸出的菌落,類似水銀滴,具有很強的折光性,菌的周圍有模糊的β溶血。 二、致病過程 百日咳桿菌附著在患者呼吸道的纖毛上皮細胞之後,經過約7至10天(平均7天)的潛伏期,白血球浸潤逐漸增加,並產生大量黏液與分泌物,阻塞氣管而導致咳嗽。纖毛上皮細胞受損後,其清除異物的功能降低,同時增加咳嗽的需要性。百日咳桿菌死亡後所產生的內毒素會影響到宿主的免疫系統,尤其是白血球的功能。加上纖毛的擴清作用受損,因此更容易發生其他致病菌在上呼吸道的次發感染。 三、臨床症狀 百日咳的臨床症狀分為三個時期: (1)卡他期:持續約1至2週。主要症狀為支氣管 炎,不斷的乾咳。 (2)發作期:持續2至4週,甚至更長,而咳嗽發 作末期出現吸氣性哮咳,且經常咳出濃稠、 極黏的黏液,這個時期最容易被診斷出來。 (3)恢復期:症狀逐漸消失而至痊癒,但若併發 肺炎則可能死亡。 四、檢驗方法 (1)拭子法:固定小兒頭部,把拭子通過鼻孔進入鼻咽部採檢。 (2)咳碟法:將Bordet-Gengou agar 置於病患口前,對準平板咳嗽後進行培養。 2、分離培養 百日咳桿菌接種於Bordet-Gengou agar或含Cephalexin的Charcoal–blood agar,因為百日咳桿菌生長需3~6天,所以接種後將平板放入無菌塑膠袋,在底層放一張含水的濾紙,放於35℃~37℃培養,使袋內充滿水蒸氣並防止黴菌污染。48小時後每天觀察,若有黴菌或細菌污染生長,用接種針把污染部分挖掉,然後每天觀察。 3、鑑定 尋找疑似菌落,為小型、凸出的菌落,類似水銀滴,具有很強的折光性,周圍有狹窄的溶血環,挑菌作Gram Stain,可看到大小一致革蘭氏陰性球桿菌,依生化反應作菌種鑑定,進一步作血清學試驗和免疫螢光染色。 (1)生化反應:Urease(-) ,Nitrate(-) ,Motility (-) Oxidase(+)。 (2)血清學試驗:以Bordetella pertussis antiserum作玻片凝集試驗。 (3)抗原免疫螢光染色:採檢鼻咽腔分泌物作抗原顯微免疫螢光染色,較培養的準確性高。 五、疫苗 目前臺灣使用的百日咳注射疫苗為死菌製成之全細胞型疫苗,其疫苗與白喉及破傷風疫苗混合而為三合一疫苗(DPT),於1949年上市。目前施打的時間為出生滿2個月、滿4個月、滿6個月分別注射乙劑,並在出生1年6個月時追加第4劑。全細胞型百日咳疫苗為一有效的疫苗,但明顯的局部紅、腫、痛及少見但可能嚴重的神經方面副作用讓它的接受度降低許多。 The End…… 謝謝各位! * * 1、檢體採集 Bordetella pertussis檢驗流程圖
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