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实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中PRL-2基因的表达_医学论文 实时荧光定量PCR检测原发性肝癌中PRL-2基因的表达_医学论文 作者：程超， 郭爱林， 巫国勇， 谢春玲， 吴伟康【摘要】 【目的】 建立TaqMan实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝细胞再生磷酸酯酶2(PRL-2) mRNA表达水平，并应用该法检测原发性肝细胞癌中PRL-2基因的表达。【方法】 构建含PRL-2基因开放阅读框架的T载体，制作标准曲线。提取手术切除12例人肝癌、门静脉癌栓（PVTT）和癌旁组织总RNA 并逆转录为cDNA。应用实时荧光定量PCR法观察人肝细胞癌组织和门静脉癌栓及癌旁组织中PRL-2 的表达水平。【结果】 线性检测范围达5个数量级,最低检测下限为1×102 拷贝,最高检测上限为1×106 拷贝。PRL-2在所有的门脉癌栓及10例肝癌组织表达，仅在4例癌旁组织中表达。门脉癌栓PRL-2 mRNA表达水平显著高于肝癌及癌旁组织（ 0.01），肝癌组织表达显著高于癌旁组织（ 0.01）。【结论】 实时荧光定量PCR可以准确定量测定PRL-2基因的表达；PRL-2基因在门脉癌栓的更高表达提示其在肝细胞癌的发生、转移中可能起重要作用。 【关键词】 肝细胞癌； 聚合酶链反应 基因表达； PRL-2基因 Abstract：【Objective】 To quantitative