当归抗β-淀粉样蛋白所引起的神经细胞毒性作用研究_药学论文.docVIP

当归抗β-淀粉样蛋白所引起的神经细胞毒性作用研究_药学论文 当归抗β-淀粉样蛋白所引起的神经细胞毒性作用研究_药学论文 作者：顾然，刘如玉，张蓝江，郝小燕，肖雁 ，齐晓岚，单可人，任锡麟，官志忠 【摘要】 　　目的研究当归对β-淀粉样蛋白引起的SH-SY5Y神经细胞中尼古丁受体亚单位在蛋白质水平降低、细胞损伤及脂质过氧化的拮抗作用，了解其神经保护作用的可能机制。方法选取一定浓度的当归预处理SH-SY5Y细胞后，再加入β－淀粉样蛋白处理，用比色法测定细胞MTT还原率，从细胞整体水平了解当归对细胞活性的影响；用Western blotting方法测定神经型尼古丁受体亚单位（α3和α7）蛋白表达水平的变化；用TBA比色法测定脂质过氧化产物（丙二醛）的水平，以了解当归的抗氧化能力。结果安全浓度的当归提取物能减弱β－淀粉样蛋白引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高，对抗β－淀粉样蛋白引起的α3和α7尼古丁受体亚单位蛋白质水平降低。结论当归有一定的神经保护作用。 【关键词】 当归； SH-SY5Y细胞； 尼古丁受体； β-淀粉样蛋白； 脂质过氧化 　　Abstract：ObjectiveTo investigate the inhibitory effects of Angelica on the neurotoxicity and the decreased expression of nAChRs induced by b-amyloid peptide (Ab) in human neuroblastoma (SH-SY5Y) cells. MethodsThe SH-SY5Y cells were treated by a certain concentration of angelica, and then exposed to 10 ml Aβ25-35. MTT reduction assay was carried out to detect the cell viability, lipid peroxidation was measured by TBARS to observe the level of oxidative stress, and the expression of nicotinic receptor α3 or α7 subunits at protein level was detected by Western blot. ResultsAngelica at a safety-dose inhibited the neurotoxicity and the increased lipid peroxidation, and prevented the decreased expression of α3 and α7 nAChR subunit protein in SH-SY5Y cells induced by Aβ.ConclusionAngelica can play an important role in neuroprotection. 　　Key words：Angelica; SH-SY5Y cells; nAChR; β-amyloid pepitide; Lipid peroxidation 阿尔茨海默氏病（Alzheimers disease，AD） 是一种以智力缓慢性进行性丧失为特征的神经退变性疾病，是痴呆病中最常见的类型［1］。AD的病因及发病机制至今尚不十分清楚，目前认为AD是由遗传学因素、环境因素和代谢因素等多种因素共同作用所引起的一种疾病，病理学上以脑细胞内神经原纤维缠结及细胞外老年斑形成为主要特征［2］。老年斑的主要成分为β淀粉样蛋白 (β-Amyloid protein, Aβ)，是一种神经毒性物质，可损伤大脑皮层与海马等与记忆相关脑区结构与功能，在AD发病机制中起关键作用。神经型尼古丁乙酰胆碱受体(Nicotinic acetylcholine receptor, nAChR )（或称尼古丁受体）与学习和记忆等认知功能密切相关，并具有明显的神经保护作用［3，4］。在较早的一些研究中就发现，AD患者大脑皮层尼古丁受体出现持续的和严重的丢失，大脑皮层的尼古丁受体缺失与AD患者的认知障碍有显著的相关性。当归为伞形科植物当归（Angelica sinensis）的干燥根，当归入药，历史悠久，应用广泛，有“十方九归”之说。近年很多研究表明以当归作为主要药材的复方中药制剂具有改善痴呆小鼠学习记忆障碍的作用［5，6］，但是当归所起的作用及其相关机制目前还不清楚。因此本研究用Aβ25-35处理来源于人脑的 SH-SY5Y 神经母细胞瘤细胞作为研究对象，以初步了解当归对