微波辐照对大鼠学习记忆行为和海马LTP影响_医学论文.docVIP

微波辐照对大鼠学习记忆行为和海马LTP影响_医学论文 微波辐照对大鼠学习记忆行为和海马LTP影响_医学论文 【摘要】 目的 研究微波辐照后学习记忆功能与长时程增强(LTP)改变的规律。方法 采用功率密度为65mW／cm2的微波全身一次辐照大鼠20min，在辐照后不同时相点观察大鼠学习记忆行为的改变(穿梭箱试验和Morris水迷宫试验)和海马离体脑片LTP的诱导变化。结果 微波辐照可导致大鼠肛温升高4，比吸收率（SAR）为12／kg。微波辐照后0，24h，大鼠主动回避反应(AAR)明显低于辐照前(0。微波辐照后0h和3h，大鼠寻找平台的潜伏期明显增加(P均lt0；空间搜索试验中辐照组大鼠在目标区域的游泳时间占整个游泳时间的百分比和跨跃平台次数均显著低于对照组大鼠(P均lt0。微波辐照后0，12，24h，3d，大鼠海马脑片LTP的诱导明显减弱(0h，0；12，24h，3d，0）。结论 在本实验条件下，微波辐照可导致大鼠空间学习记忆能力受损，海马脑区LTP的诱导障碍是大鼠学习记忆功能损害的细胞电生理学基础。 【关键词】 微波 　　随着微波技术的不断发展，应用领域越来越广，环境中电磁辐射水平较以往有较大提高〔1〕，给职业接触者和居民的健康带来潜在的危害。神经系统对微波辐射甚为敏感。以往的研究发现，在一定剂量下，微波辐照可致大鼠神经系统损伤，中枢神经系统(CNS)是微波辐照敏感的靶器官，海马脑区是重要的靶区。微波辐照可致实验动物学习记忆功能等神经行为障碍〔2〕。海马脑区与空间学习记忆功能高度相关，水迷宫试验主要检测动物的空间学习记忆能力。长时程增强(LTP)是公认的海马学习记忆的细胞突触模式，与整体学习记忆功能高度相关。因此，本研究观察了微波辐照对大鼠学习记忆等神经行为的变化与LTP的改变的联系，进一步阐明微波辐照致学习记忆功能障碍的变化规律和电生理学基础。 　　1 材料与方法 　　1主要仪器 微波源(西安黄河厂)；HP8991A脉冲功率计(美国HP公司)；微电极放大器(MEZ-7300，日本Nihon Kohden公司）；示波器(SR-76，汕头电子仪器厂)；多通道电生理刺激器(南通电子总厂)；Morris水迷宫试验系统(中国医学科学院)；双向穿梭箱(本校生理教研室研制)。 　　1主要试剂配制 人工脑脊液(ACSF)(mmol／L)：124 NaCl、5 KCl、2 MgSO4、1、24 NaHCO3、2 CaCl2、10 GS(葡萄糖，pH7～7。 　　1实验方法 　　1实验分组 健康雄性Wistar大鼠54只(经训练筛选后用于正式试验的动物)，体重180～220g(第三军医大学动物实验中心提供)。主动回避反应试验和Morris水迷宫试验将大鼠随机分为2组：对照组(n=12)，微波辐照组(功率密度65mW／cm2，n=12)；2组在微波辐照后不同时相点进行相应的检测。脑片LTP的检测实验将大鼠随机分为2组：对照组(n=6)，微波辐照组(功率密度65mW／cm2，n=24)；微波辐照组又分为0，12，24h，3d 4个辐照后时相点，每个时相点6只动物。 　　1微波辐照动物 动物辐照在微波辐照暗室内进行。环境温度(20±2)℃，湿度50％～70％。动物置于可透射微波的专用辐照盒内，在匀速旋转的实验平台上接受全身一次性辐照20min。 　　1微波辐照对大鼠体温的影响 用热电偶点温计(精确度±0测定在大鼠微波辐照前和辐照后即刻肛温，计算大鼠比吸收率(SAR)值。 　　1主动回避反应(AAR)训练〔2〕 采用计算机控制的光信号刺激的双向穿梭箱，以灯光作为条件刺激，建立条件性穿梭反应，即AAR。动物每天连续训练20次，每次间隔为30s，连续训练8d，选取最后2d内习得率≥80％的动物用于实验。分别在微波辐照后0，12，24h和3d，再测试动物AAR。以上实验均在避光和安静环境中进行，其操作均由计算机自动控制和自动记录。 　　1水迷宫试验〔3〕 辐照前3d，每天训练大鼠，使其学会游泳并能熟练找到平台，剔除不会游泳和不能较快找到平台的大鼠，其余大鼠用于正式实验。辐照后每天分两段训练，每段训练4次，观察并记录大鼠寻找并爬上平台的路线图、所需时间(潜伏期)及游泳速度。在第4d的训练后撤除平台，然后任选一个入水点将大鼠放入水中，让其自由游泳120s，测其在中心区域游泳时间占总时间的百分比和跨过平台相应位置的次数，并记录大鼠搜索平台的线路图。 　　1大鼠海马离体脑片LTP的检测〔4〕 大鼠断头活杀，迅速分离左侧海马，顺海马槽纤维的走向连续切片，片厚400～450μm，迅速将其移至浴槽尼龙网上，随之保证持续的恒温ACSF灌流(32±0和供氧(0／min)。本实验记录的电活动是Schaffer侧枝-CA1区锥体细胞的场兴奋性突触后电位(fEPSP)。LT