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我国菲牛蛭的研究概况_药学论文
我国菲牛蛭的研究概况_药学论文
【摘要】 综述了我国菲牛蛭的地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节、化学成分、生物活性成分、药理学作用、分离纯化以及菲水蛭素基因的克隆和序列测定。认为菲牛蛭可作为一种新的药用资源加以研究。
【关键词】 菲牛蛭 化学成分 药理学作用
菲牛蛭Poecilobdella manillensis,俗名金边蚂蟥,别名为马尼拉医蛭,隶属于环节动物门Annelida,蛭纲Hirudinea,无吻蛭目Arhynchobdellida Blanchard,医蛭科Hirudindae Whitman,牛蛭属Poecilobdella Blanchard。牛蛭属已知种有菲牛蛭Poecilobdella manillensis Lesson 颗粒牛蛭Poecilobdella granulosa,湖北牛蛭Pecilobdella1 hubeiensis 和Poecilobdella viridis。1968年国外Keegan[1]对东南亚的菲牛蛭生活习惯进行观察。1992年Steiner[2]从产自马尼拉的菲牛蛭中分离纯化新的水蛭素, 测定其原始结构和功能表明有抗凝活性。1993 年Scacheri[3]从菲牛蛭中分离出2 种水蛭素变异体, 测定其氨基酸序列,cDNA 克隆和表达, 表达产物有抗凝活性。2002 年谭恩光等[4]从广东产的菲牛蛭基因组中PCR扩增出水蛭素基因, 并克隆和测序。在此,本文仅对我国菲牛蛭的一些研究进行综述,为开发菲牛蛭资源提供参考。
1 菲牛蛭地理分布、野生资源情况、生态习性和采收季节
菲牛蛭主要分布在菲律宾、泰国、越南等东南亚地区及中国的东南、中部和西南部地区。由于有关我国菲牛蛭地理分布、野生资源情况以及生态习性和采收季节相关报道很少,因此,我们对广西区内具有代表性的灵川、象州、岑溪、博白、防城、隆安、田东等15个县(市)的菲牛蛭品种生物学特征、资源数量分布、生态习性和采收季节进行调查,共收集到水蛭样品15份。经外貌与形态特征的初步鉴定,与我国水蛭分类学专家杨潼所描述的菲牛蛭相同,说明区内分布的水蛭以菲牛蛭品种为主。分布在区内各地的菲牛蛭,经体重测定差异不显著,但在数量上桂东南地区明显多于桂西北,钦州、防城野生资源比较丰富,罗城、巴马等地野生资源稀少。数量分布的多寡与温度、雨量、湿度等气候因素有关,符合水蛭喜温、湿、热的特性。通过样品的收集为优化种苗选择提供了丰富的物质基础。
菲牛蛭生态环境要求和生态习性:根据野外的考察表明,菲牛蛭喜欢在土壤含铁量较高、水体呈弱酸性(pH值5.5~7.0)的环境中繁衍。在野外多发现于荒芜的山塘和山冲田块或湿草地,尤其是土层深厚、土质疏松潮湿,各种水草生长旺盛,并且经常有耕牛、人活动,呈土畦式水体相对固定的环境中多见,常年耕作的田块和已开发养殖的山塘或大面积连体的水体中很少发现。
菲牛蛭的采收季节:经调查发现,菲牛蛭对温度反应敏感。水温在25~30℃时,活动最活跃,生长最快,也是繁殖的季节。在野外当水温低于15℃时便停止活动,因此,每年的11月前后到次年的4月前后很少发现有菲牛蛭在水中活动,这时它们都进入泥土里越冬,这与其为冷血变温动物,冬季具有冬眠习性相一致。这样菲牛蛭的采收时间宜选择在9~10月份,此时,气温下降,菲牛蛭生长速度减慢,但仍在水中,易于捕捉。
2 菲牛蛭的化学成分
2.1 菲牛蛭中脂肪酸分析苗艳丽等[5]对广西产菲牛蛭脂肪酸提取液进行气相色谱/质谱(GC/MS)分析,共分离出19 个峰。与标准谱库对照分析,鉴定了16个组分, 脂肪酸的相对含量采用总离子流各色谱峰面积归一化法定量,结果见表1。实验共鉴定了菲牛蛭中脂肪酸的16个组分,占脂肪酸总量的97. 39 % ,其中饱和脂肪酸占63.34%,不饱和脂肪酸占34.05%。饱和脂肪酸主要有硬脂酸、棕榈酸、肉豆蔻酸等;不饱和脂肪酸主要包括油酸、11 - 二十碳烯酸等。其中含量最多的是十六烷酸,达到23.78%,其次是9 - 十八碳烯酸,含量为12.53%;11 - 二十碳烯酸含量为11.75%。菲牛蛭中所含的单不饱和脂肪酸,如9 - 十八碳烯酸和11 - 二十碳烯酸的含量高于中药蚂蟥中的含量[6]。
表1 菲牛蛭中脂肪酸的组成及含量
序号脂肪酸 分子式(甲脂)相对含量( % )13 - 甲基十三酸C15H30O21. 022十四酸(肉豆蔻酸) C15H30O22.8834, 8, 12 - 三甲十三酸C17H34O27. 434十四酸(异构体)C15H34O20. 655十五酸C16H32O21. 48614 - 甲基十五酸C17H34O2 1.279 - 十六烯酸C17H32O23. 968十六酸(棕榈酸) C17H34O2 23.7891
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