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扇贝糖胺聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒的抑制作用_医学论文
扇贝糖胺聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒的抑制作用_医学论文
作者:于囡 刘赛 韩建建 孙福生
【摘要】 目的 研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS不同浓度及不同作用时间对Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV的抑制作用。方法 以HSV株感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),观察病毒感染后的细胞变性反应(CPE),并检测不同浓度SS及不同作用时间对HSV复制的抑制作用。结果 与病毒对照组相比,SS各浓度组(100、50、25 mg/L)能有效保护经HSV感染的Vero细胞,使细胞活性增强(F=27.54,0.01);并减弱HSV导致的病变效应,抑制病毒的复制,并且随着药物作用时间的延长,药物抗病毒效应逐渐增加, 最高达88.64%。结论 SS体外具有明显的抗HSV病毒作用。
【关键词】 糖胺聚糖 扇贝裙边 疱疹病毒Ⅰ型 人
[ABSTRACT] Objective To study the inhibitory effect of glycosaminoglycan from scallop skirt (SSnd concentration,on typeⅠ herpes simplex virus (HSVⅠ). Methods The Vero cells were infected by HSVⅠ SM44, and their degeneration then observed.The inhibitory effect of SSGAG, in different concentration and time, on replication of HSVⅠ was detected. Results Compared with the virus control group, SSGAGtreated group could protect the Vero cells effectively and heighten the cell activity (F=27.54,0.01), and could lessen the cytopathic effect induced by HSVffect increased along with the prolongation of drug used, the ER% could reach the highest of 88.64%. Conclusion SSGAG shows siginificant activity of protecting host cell and antiviral effect against HSV1 in vitro.
[KEY WORDS] Glycosaminoglycan Scallop skirt Herpesvirus 1, human
单纯疱疹病毒(HSV) 属疱疹病毒科, 为DNA 病毒, 其病毒基因组由一线形的双股DNA 分子构成。Ⅰ型人类单纯疱疹病毒可引起唇疱疹、疱疹性角膜结膜炎、新生儿脑炎等多种疾病,目前尚无有效疫苗用于预防。临床应用的抗病毒药物毒性大,加之毒株的变异容易产生耐药性,因此,筛选研制新的抗病毒药物就尤为重要。近年来,随着海洋生物资源的开发,人们发现了许多具有独特生物活性的海洋生物多糖。扇贝裙边糖胺聚糖(SS是从海洋贝类扇贝裙边中提取、纯化得到的酸性黏多糖(即硫酸多糖)。据文献报道,动物体内的硫酸多糖具有多种药理活性,如抗凝血、降血脂、抗病毒及增强免疫功能等,已引起人们对这类生物高分子的高度重视[1,2]。本实验以非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)为宿主细胞,通过细胞培养法对扇贝裙边糖胺聚糖(SS)在不同剂量及不同给药时间其体外抗Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV)的作用进行了初步研究。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 实验材料
SS为青岛大学医学院药理教研室扇贝糖胺聚糖课题组提供的粉剂,实验时用无血清DMEM培养基配成不同浓度的溶液;DMEM干粉培养基为Hyclone公司产品胎牛血清(Fetal Bovine Serum,FBS)为杭州四季青生物工程材料有限公司产品;胰蛋白酶为AMRESCO公司产品;乙二胺四乙酸二钠(EDTA)由青岛海泰生物技术有限公司分装;酸性异丙醇为上海亨达化学试剂有限公司产品;四甲基偶氮唑蓝(MTT)为Sigma公司产品。TC 2323型CO2培养箱为美国FormaScientific公司产品XDP型倒置显微镜为日本Olympus公司产品ELx 800型酶联免疫检测仪为美国BioTek公司产品细胞培养板为Costar公司产品超净工作台为苏净集团安泰公司产品。标准单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV
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