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新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响_药学论文
新型人趋化素样因子超家族8对人白血病细胞增殖和表皮生长因子受体表达的影响_药学论文
作者:陈绍倩,杜英,黄玉敏,王鑫,顾巧丽,董子明【摘要】 本研究探讨新型趋化因子CKLFSF8对人白血病HL60细胞的增殖和表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响,应用RTPCR方法检测CKLFSF8基因在HL60细胞中的表达;利用脂质体将CKLFSF8基因转染到HL60细胞,在倒置显微镜下观察细胞生长;MTT法检测细胞的增殖程度;免疫细胞化学法检测CKLFSF8基因转染前后HL60细胞EGFR的表达。结果表明: 在细胞生长过程中可检测到CKLFSF8表达;CKLFSF8基因转染前后HL60细胞的增殖受到了明显的抑制,与空白对照组和空质粒组相比有显著性差异(P﹤0.05);对比转染前后细胞EGFR表达的阳性率具有显著性差异(P﹤0.01)。结论: CKLFSF8基因转染对白血病细胞HL60的增殖和EGFR的表达有明显抑制作用。
【关键词】 CKLFSF8; HL60细胞; 细胞增殖; EGFR
Effects of Novel Human Chemokinelike Factor Superfamily 8 on Proliferation and EGFR Expression of HL60 Cells
Abstract This study was aimed to investigate the effect of chemokinelike factor superfamily 8 (CKLFSF8) on proliferation and expression of epidermal growth factor receptor (EGFR) of HL60 cells. Expression of CKLFSF8 mRNA on HL60 cell line was assayed by RTPCR; the target gene was transfected into the cells by lipid vector, cell proliferation was determined by MTT assay, while expression of EGFR in HL60 was determined by immunocytochemical technique. The results indicated that expression of CKLFSF8 existed in HL60 cells. After transfection, cell proliferation was inhibited (P﹤0.05) and the expression of EGFR in HL60 cells was also discovered to be inhibited (P﹤0.05). It is concluded that the proliferation and expression of EGFR in HL60 cells can be inhibited by transfection of CKLFSF8. The novel chemokine may provide a new approach in the treatment of leukemia.
Key words CKLFSF8; HL60 cell; cell proliferation; EGFR
趋化因子(chemokine)是一组具有趋化活性的小分子蛋白质,在炎症、肿瘤、自身免疫性疾病、变态反应及AIDS的演化等过程中发挥重要作用[1]。趋化素样因子超家族成员8 (chemokinelike factor superfamily, CKLFSF8)是新近发现的新型人类趋化因子。研究发现,大多数细胞内都有该因子的表达,在肝脏、肺脏和胰腺细胞内高表达;CKLFSF8 在某些肿瘤组织和肿瘤细胞中也有表达[2],但有关CKLFSF8对肿瘤细胞表皮生长因子影响的研究报道尚少。为了探讨这种新的趋化因子在白血病的发生发展中的作用,我们选择白血病细胞株HL60为研究对象,观察新型细胞因子CKLFSF8对HL60的增殖和表皮生长因子受体 (epidermal growth factor receptor, EGFR)表达的影响。
材料和方法
菌株和质粒
E.coli DH5α购自Gibco公司。带有目的基因片段CKLFSF8的质粒pCDNA3.1和pEGFP由北京大学人类疾病基因研
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