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模拟失重大鼠下丘脑不同部位的Fos和GFAP表达_医学论文 模拟失重大鼠下丘脑不同部位的Fos和GFAP表达_医学论文 作者：宿长军　饶志仁　张立藩 【关键词】,下丘脑 　　关键词:下丘脑基因，Fos神经胶质原纤维酸性蛋白失重模拟 　　摘要:目的了解长期模拟失重状态下大鼠下丘脑功能活动状态.方法用Fos和胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）的ABC法，分别检测4周模拟失重大鼠下丘脑神经元和星形胶质细胞（AS）的变化.结果二者表达仅见于室旁核尤其大细胞部、视上核和视交叉上核，而其它部位未见表达AS胞体变大、突起增粗增长.结论下丘脑这些核团参与了对长期失重的反应，且可能与加压素分泌增加有关. 　　Keywords:hypothalamusgene，Fosglialfibrillaryacidicproteinweightlessnesssimulation 　　Abstract:AIMToresearchthefunctionsofrathypothala-musunderlong-termsimulatedweightlessnesscondition.METHODSByusinganti-Fosandanti-GFAPimmunohis-tochemicalABCmethods，weobservedchangesofhypothala-musneuronsandastrocytesin4wksimulatedrats.RE┐SULTSExpressionsofFos-andGFAP-positivecellswereonlyfoundinparavetricularnucleiofthehypothalamus，es-peciallyinmangocellularpart，supraopticnucleiandsuprachiasmaticnuclei，withnegativereactioninotherareas.Thereactiveastrocyteswerefeaturedwithhypertrophyof thecellbodyandcytoplasmicprocesses.CONCLUSIONThesenucleiinhypothalamusmayparticipateinthereactiontolong-termweightlessness，andprobablybeassociatedwithincreasedsecretionofvasopressure. 　　0引言 　　下丘脑-垂体系统为调节机体机能的活跃区，航天引起的生理变化几乎都受神经内分泌的影响.失重是航天员无法消除的因素，失重后下丘脑-垂体系的变化直接或间接影响心血管系统、水盐代谢、骨质代谢及免疫和肌肉的适应性变化［1］.有研究表明，PVN在失重后加压素（AVP）功能发生变化，AVP分泌增加，显示其对失重的反应［2，3］.但长期失重后下丘脑功能活动是否有变化仍不清楚. 近年星形胶质细胞（AS）在神经系统中的作用已受重视，表现出多种结构和功能，与神经元间存在双向通讯，在神经系统功能活动中具有重要的作用［4，5］.研究发现太空飞行14d大鼠海马内GFAP表达明显减少［6］，但下丘脑部位GFAP表达有否变化及与神经元间的关系未见报道. 我们拟利用功能形态学的方法，观察4wk模拟失重大鼠下丘脑内Fos和GFAP表达的变化，探讨下丘脑PVN和SON的神经元和AS是否参与对失重的反应，并探讨二者之间的关系. 　　1材料和方法 　　1.1实验组 　　1.1.1动物模型制备体质量160g左右的雄性Spraque-Dawley大鼠（本校实验动物中心提供）.按体质量配对原则随机分为悬吊组与同步对照组各6只.悬吊组尾部悬吊按文献［7］方法进行，动物在悬吊期间始终保持-30°头低位及后肢悬空不负重.2组分别单个饲养，每日摄入饲料成分与食量相当，饮水不限，室温保持在（23±2）℃，人工控制动物室内照明，每昼夜均保持12h光照与黑暗循环交替，室内保持安静. 　　1.1.2切片制备动物解除悬吊后立即在戊巴比妥钠（40mgkg-1，ip）深麻下开胸，经升主动脉插管，先以100mL生理盐水冲洗血液，继以含40gL-1多聚甲醛的0.1molL-1磷酸缓冲液（pH7.4）500mL，灌流1.5h以上，注毕立即取脑置于200gL-1蔗糖溶液中过夜（4℃），至组织块沉底.下丘脑部位作冰冻连续冠状切片，片厚30μm，置于10mmolL-1的PBS中. 　　1.1.3免疫组化反应（ABC法）切片先入含3gL-1TritonX-100的PBS浸泡30min（室温）.切片分为二组:第一组:抗Fos蛋白免疫组化反应（ABC法）:抗Fos蛋白