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流动相的离子强度对RP_医学论文 流动相的离子强度对RP_医学论文 作者：刘浩 王红武 丁建英 仇仕林 【关键词】 ,,RP 　　摘要： 在反相高效液相色谱(RPHPLC)过程中，流动相的离子强度可显著影响可解离的化合物如抗生素的色谱峰形，原因在于流动相的离子强度较低时，色谱填料的固定相易于过载，使离子化的化合物的色谱峰形呈典型的过载特征――峰形接近直角三角形。随着进样量的增加，色谱区带中高浓度的前半部的保留时间减少，但色谱区带均在同一时刻结束，色谱峰的拖尾因子及峰宽均显著增加，同时被测物与有关物质间的分离也随之变差。选择合适的缓冲盐并适当地增加流动相的离子强度即可显著改善抗生素的色谱峰形，色谱峰的拖尾因子及峰宽均随之降低，同时被测物与有关物质间也更加易于分离。 　　关键词： RPHPLC； 抗生素； 色谱峰形； 流动相； 离子强度 　　Influence of the ionic strength of mobile phase on peak shape　of antibiotics in RPHPLC 　　ABSTRACT The ionic strength of mobile phase can significantly affect the peak shape of ionogenic compounds such as antibiotics in reversedphase high performance liquid chromatography (RPHPLC). The influence may be attributed to overloading of ionogenic analytes in lower ionic strength mobile phase. In such phase, peak becomes increasingly rightangled triangle in shape with increasing sample load together with increasing peak width and tailing. The retention time of the highconcentration front decreases with increasing sample load, while the end of the peak tail has a constant retention time, equal to the symmetrical analytical peak. Due to considerably worse peak shapes, poorer resolution between the main component and its related substances might be observed. With the optimal buffer and the increase of ionic strength, significant improvement in peak shape of antibiotics could be achieved and consequently a decrease in the tailing factor, an increase in the apparent column efficiency as well as an efficient resolution were obtained. 　　KEY WORDS RPHPLC Antibiotics Peak shape Mobile phase Ionic strength 　　据统计，约80%的药物含有碱性官能团，故碱性化合物的反相高效液相色谱(RPHPLC)行为在色谱学界始终是一个引人注目的研究课题，而具有不同pKa值的碱性药物的RPHPLC分离在药学界的重要性正日益被关注［1］。然而，由于碱性化合物的保留可随着流动相pH值的不同而产生显著的变化，因而它们的RPHPLC分离通常具有一定的难度。在某些pH范围内，碱性化合物的色谱峰拖尾，表观柱效(理论板数，n)较低，其原因可能包括色谱柱的过载、碱性化合物与填料表面残余硅醇基的相互作用以及较慢的吸附解吸附动力学等。绝大多数抗生素同时含有碱性和酸性基团，多为亲水性的两性化合物，故其RPHPLC行为远较通常的碱性化合物更为复杂。我们在应用现行各国药典［2～4］进行抗生素RPHPLC分析时发现，有些抗生素的色谱峰形异常――峰形展宽并接近直角三角形，色谱峰的拖尾因子及峰宽均较大，有时甚至影响到被测物与有关物质间的分离。囿于目前的填料制造水平，以硅胶为基质