海洋小单孢菌来源的轻快菌素B FW5233的体外抗肿瘤活性_药学论文.docVIP

海洋小单孢菌来源的轻快菌素B FW523的体外抗肿瘤活性_药学论文 海洋小单孢菌来源的轻快菌素B FW523的体外抗肿瘤活性_药学论文 【摘要】 目的 考察轻快菌素B FW523的体外抗肿瘤活性。方法 采用MTT比色分析法、流式细胞法和高内涵药物筛选的方法检测FW523对肿瘤细胞株细胞生长、细胞周期、肿瘤细胞骨架蛋白、线粒体膜电位的影响。结果 FW523对肿瘤细胞株K562、L929的生长有明显抑制作用，IC50分别为500和400ng/ml。FW523处理后的K562肿瘤细胞阻滞在G0/G1期。FW523使L929肿瘤细胞的细胞核大小、细胞骨架纤维状肌动蛋白F量、线粒体膜电位明显减少。结论 FW523有显著抗肿瘤活性。 【关键词】 轻快菌素； 抗肿瘤作用； 海洋小单胞菌 ABSTRACT Objective To investigate the antitumor activities of rakicidin B FW523ondrial membrane potential of the tumor cells were assayed by the colorimetric MTT assay, flow cytometry and high content screening methods. Results FW5233 strongly inhibited the cell proliferation of K562 and L929 tumor cell lines with IC50 value of 500ng/ml and 400ng/ml, respectively. K562 cells were arrested in G0/G1 phase when treated with FW5233, which had the ability to decrease the size of nucleolus, disrupt tumor cell Factin synthesis and reduce mitochondrial membrane potential. Conclusion FW5233 exhibited potent antitumor activities. KEY WORDS Rakicidin; Antitumor; Marine Micromonospora 微生物次级代谢产物是新药的重要来源。海洋微生物具有独特的代谢方式，产生的次级代谢物化学结构具有明显的复杂性和多样性，有的是陆地微生物所不具备的。海洋微生物药物的研究开发工作始于20世纪70年代，在90年代得到很大的发展。迄今已从海洋微生物的代谢产物中分离出几百种生物活性物质，其中有些是可能有临床应用价值的抗肿瘤抗生素，如海洋放线菌产生的新型抗肿瘤抗生素lomaiviticins［1］和salinosporamideA［2］已进入临床研究阶段。因此从海洋微生物中筛选到新型抗肿瘤抗生素的成功率相对较大。 从海洋小单孢菌筛选新抗肿瘤生物活性物质过程中，我们发现了海洋小单孢菌Micromonospora sp. FIM 02产生有抗肿瘤活性的脂肽类化合物FW523，该化合物有5个单组分。经波谱分析和理化性质研究，发现组分3(FW523与轻快菌素B(rakicidin B)同质［3］。本文报道FW523的体外抗肿瘤活性。 1 材料与方法 1.1 样品 FW523样品(HPLC纯度99.8%)，福建省微生物研究所国家新药微生物筛选实验室制备；紫衫醇(paclitaxol)购自美国Sigma公司。上述样品分别用无水乙醇配制成1mg/ml母液，-20℃备用。 1.2 方法 (1)FW523对人类红白血病肿瘤细胞株K562细胞生长的抑制作用 肿瘤细胞株K562细胞以2×105/ml浓度加入96孔板，每孔100μl，分别加入用完全1640培养液稀释的FW523，空白对照只加培养液，将培养板置37℃、5% CO2培养箱培养72h，把培养后的96孔板以MTT比色分析法测定各孔在570nm的光吸收值A570，计算不同浓度的FW523对细胞增长的抑制率。 抑制率=(对照A570值-样品A570值)对照A570值×100% (2)对人类红白血病肿瘤细胞株K562细胞周期的影响 对数增长期的K562细胞接种于6孔细胞培养板中，每孔细胞1×106个，总体积4ml，加入FW 523至其终浓度分别为125、250、500和2000ng/ml，36h时终止培养。分别收集细胞，PBS洗两次(1000r/min，5min)，细胞重悬于1ml冷75%乙醇中固定过夜，加等量的PBS洗两次(1000r/min，5min)，加胰RNA酶(10