Waters Aliance HPLC高效液相色谱系统.docVIP

Waters Alliance HPLC高效液相色谱系统操作规程刘志刚暨南大学包装工程研究所 **** 本电脑严禁上网！ 本电脑严禁使用未经杀毒的软盘、光盘、移动硬盘等存储设备！ **注意** →Waters 2996二极管阵列PDA检测器使用手册→Waters 2487-双λ吸光度检测器操作员指南→Waters 2475-荧光检测器使用指南→Waters 2414-示差折光检测器操作员指南。 软件顺序：Empower系统安装和配置指南→Empower软件入门指南→Empower自动归档软件安装和配置指南→Empower PDA软件入门指南→Empower数据采集和处理原理指南→Empower谱图匹配使用指南→Empower系统适用性简要指南 简要规程 开机自检完成后平衡系统，电脑运行Empower软件； 建立存放数据、结果的文件夹； 建立“仪器方法”并加载进“方法组”； “平衡系统”使基线稳定； 输入样品信息运行样品＋监视系统； 建立“结果处理方法”，对目标结果运行结果处理方法预览/出版报告； 流量为“零”； 检查HPLC系统各部分，确定无误后，退出Empower软件； 关闭HPLC系统，关闭电脑 注： 为保证系统运行安全和数据结果可靠，请仔细阅读“详细规程”！ 软件名称：Empower 2 Software 版本：Build 2154-C 生产日期：2005－9－19 数据库版本：6.10.00.00 数据服务：Djsrc22x 数据库ID：737385556 Waters Alliance HPLC详细规程 开机前的准备工作： 检查设备电源、流路、信号连接是否完好； 流动相：若使用先前相同的流动相则检查流动相是否需要添加，若需使用新的流动相则按色谱条件要求配制相应的流动相，经0 45(m微孔滤膜抽真空过滤后超声除气泡。 *注意；在配置流动相过程中，保证流动相输入管（包括滤头）浸没在液体中，切忌暴露于空气中以避免气泡的生成； 样品溶液：按方法要求取样或配制标准样品溶液，并以0 45(m微孔滤膜过滤或高速离心方式除去溶液中的固体微粒。 *注意：针对不同样品溶液适当选择滤膜，分清楚水系或是有机系滤膜。 开机平衡系统： 打开仪器各部件电源，待仪器各部分自检完成后，打开电脑进入Empower工作站； 将配制好的流动相放入600样品槽中； 双击Empower，输入用户名、密码进入Empower系统，再双击“配制系统”，进入配制管理器，点击“文件→新建→项目”新建一个项目，如果“项目”已建好，此步可省去； 在Waters2695分离单元的屏幕面板上操作，设定流量流动相以平衡；*注意：在Empower中点击“运行样品”，左侧选择“采集数据的项目”，右侧选择“色谱系统”进入运行样品界面； *注意：选择的“色谱系统”必须为在线系统，若不在线则需要进入“配置系统”，然后点击“系统”会显示各配置系统的名称，然后先选定目前“在线”的系统，点击右键后选择“离线”，等完成操作后去选择你的目标“在线”系统，点击右键后选择“启用”； Empower Pro软件“运行样品”界面，如果已有“仪器方法”和“方法组”，则直接到第7步。否则，在“运行样品”的“单进样”界面点击“创建方法组”，新建方法组，可包含“处理方法”、“报告方法”和“导出方法”，随后设定“方法名”，会出现在“方法组”菜单中。下中部有“仪器方法”，选择“编辑”打开“仪器方法编辑器”，上方会出现步骤5中选择的色谱系统所包含的色谱仪器，选择某一仪器设置参数，比如Waters2695分离单元至少需要设置“脱气”选项，将“脱气模式”打开，“流量”，设定色谱方法中规定的流动相组成及流量，“柱温”选项中根据色谱方法中柱温要求进行设定。对于Waters2996需要设定2D时的通道波长（最多8个检测通道即检测8个波长）或3D时的扫描范围（即起始扫描波长和结束扫描波长）。对于Waters2487需要设定通道波长（2个通道）。对于Waters2475需要设定激发波长和发射波长； 选取“仪器方法”，若已经建立平衡系统的仪器方法如“Equilibrate the System”则直接选取此方法，然后按“监视基线”键，让系统平衡约30分钟，使基线稳定；如果系统刚开机，则首先要用100%甲醇平衡系统30分钟，随后选择设定的“仪器方法”，按照该方法中流动相的组成再进行系统平衡，开启“监视基线”，直到基线平稳达到样品分析流动相条件； *注：当有多个“仪器方法”和“方法组”存在时要注意选择当前需要使用的“仪器方法”和“方法组”；当“仪器方法”改变时尤其是流动相组成等发生变化时，必须对系统重建平衡，也就是在新的“仪器方法”流动相条件下平衡系统30分钟以上，使得基线重新稳定； 进样： 待“监视基线”稳定也就是系统压力稳定后，点击“中