粪肠球菌的群体感应现象.docVIP

粪肠球菌的群体感应现象 摘 要:研究粪肠球菌 4－3－2 在不同菌体密度下细菌素 H 抑菌活性的变化规律，并确定了阈值为 1/5TPY 培养基，此条件下没有抑菌活性; 通过在正常密度和阈值密度两种培养条件下各自加入不同浓度( 105、106、107、108CFU / mL) 的溶液后再发酵的方法，证明发酵液中含有信号分子，且其为影响细菌素 H 抑菌活性的主要因素。 关键词:乳酸菌，群体感应，菌体密度 Quorum－sensing behavior of Enterococcus faecalis Abstract: To investigate the Enterococcus faecalis 4 － 3 － 2 on the diversification of the bacteriocin H antibacterial activity in a different cell density，meanwhile the result showed that it was not antibacterial activity under threshold condition of medium 1 /5TPY.Indeed，based on the conditions of the normal density and threshold density，mixing into different concentations seperately( 10 5 ，10 6 ，10 7 ，10 8 CFU /mL) and then adopting fermentation method，which proved that themain factor of affecting bacteriocin H antibacterial activity was because of the signaling molecules in fermentation broth. Key words: Lactic Acid Bacteria; quorum sensing; bacterial density 中图分类号: TS201.3 文献标识码: A 文 章 编 号:1002－0306( 2013) 19－0119－04 收稿日期:2013－01－28 * 通讯联系人 作者简介: 塔娜( 1987－) ，女，硕士研究生，研究方向: 乳酸菌的开发与 应用研究。 基金项目: 国家自然科学基金资助项目( 。 乳酸菌是目前世界上公认安全的食品级微生 物，且是一种广泛应用于食品工业生产的革兰氏阳 性细菌。细菌素是乳酸菌在代谢过程中产生的一类 蛋白类抗菌物质，可在体内被蛋白酶消化 ［1］ ，并对与 其遗传关系相近的细菌具有溶菌或杀菌作用 ［2］ 。群 体感应( quorum sensing，QS) ，是细菌根据种群密度大 小进行胞内或胞间信息传递，调节群体行为和调控 基因表达的一种机制 ［3］ 。它利用可在细胞间扩散的 信号分子来感知菌群的数量变化，在信号分子的浓 度到达一定数值时将启动其相关的基因表达，调控 与之相关生物学功能 ［4］ ，是乳酸菌与外界环境进行信 息交流的重要调控系统，特别是与细菌素合成有关 的 QS 机制，因此对它的研究有助于构建食品级基因 表达系统并解释发酵调控机理。QS 机制最先在费 氏弧菌( Vibrio fischeri) 中被发现，其主要组分为 LuxI －LuxＲ 蛋白，并用信号分子 N－ 酰基高丝氨酸内酯 ( acyl－homoserine lactones，AHLs) 进行传递 ［5］ 。而在革 兰氏阳性菌( G + ) 中，细胞与细胞间的信号传导是通 过分泌修饰后的小分子寡肽类物质( Autoinducing peptides，AIP) 完成的 ［6］ 。与具有种特异性的 AHLs 和 AIP 这 两 类 信 号 分 子 不 同，二 型 自 诱 导 物 ( autoinducer 2，AI－2) 是种间细胞交流的通用信号分 子。本实验研究对象是采样于内蒙古锡林郭勒盟地 区牧民家庭自制酸马奶酒中的各株乳酸菌。贺银凤 等已对样品进行了乳酸菌的分离和抗菌活性的探 究，对其中筛选出的抑菌活性最强的两株菌: 肠膜明 串珠菌葡聚糖亚种 3－3－2 和粪肠球菌 4－3－2，研究 了其影响抑菌活性物质产生的因素，抑菌谱，细菌素 的粗提及粗提物理化特性，并探讨了这两株菌最佳 培养基配比、提取与纯化具有抑菌活性的物质及其 在巴氏乳中防腐保藏方面的运用，且从乳酸菌与酵 母菌共生关系上对发酵产品的发酵机理做了进一步 的阐述。但是在实验过程中时有抑菌性消失的现 象，因此设计了本实验。 1 材料与方