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3.不同植物激素使用顺序、用量和比例 * 专题3 植物的组织培养技术 课题1菊花的组织培养 （一）植物组织培养的基本过程 一 基础知识 原理： 植物细胞的全能性 离体的 植物器官、 组织、细胞 愈伤 组织 脱分化 根芽 再分化 植 物 体 例1：下列关于愈伤组织叙述错误的是 A. 愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B. 愈伤组织的细胞具有全能性 C. 愈伤组织是由排列紧密的薄壁细胞组成 D. 愈伤组织可形成具有生根发芽能力的胚状结构 ①脱分化： 由高度分化的植物器官、组织或 细胞产生愈伤组织的过程。 脱分化（去分化）、愈伤组织、再分化： C ②愈伤组织的特点： 排列疏松无规则、高度液泡化、细胞壁薄等 ①脱分化： 由高度分化的植物器官、组织或 细胞产生愈伤组织的过程。 脱分化（去分化）、愈伤组织、再分化： ③再分化： 脱分化产生的愈伤组织继续进行培养， 重新分化成根或芽的过程。 细胞分化、脱分化（去分化）、再分化 三者的关系 未分化 的细胞 分化 (高度)分 化的细胞 脱分化 (相对)未分 化的细胞 (高度)分 化的细胞 再分化 例2：下列叙述错误的是 A. 细胞的分化在一定条件下是可逆的 B. 细胞分化的本质是DNA分子结构发生了改变 C. 细胞分化是指细胞的形态、结构和功能发生 稳定性改变的过程 D. 细胞分化发生在生物体的整个生命进程中 B （二）影响植物组织培养的因素 1.外植体的选取 不同植物的组织培养难度不同 同一种植物的不同组织培养难度不同 如：菊花 未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 2.培养基的配制（MS培养基） 大量元素： C、H、O、N、P、S、K、Ca、Mg 微量元素： Fe 、Mn 、B、 Zn 、Mo 、Cu、I 有机物： 甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 植物激素： 生长素、细胞分裂素等 P33 分化频率提高 同时使用 细胞既分裂也分化 先使用细胞分裂素 利于细胞分裂，但不分化 先使用生长素 实验结果 使用顺序 生长素/细胞分裂素 比例高：利于根的分化、抑制芽的形成。 比例低：利于芽的分化、抑制根的形成。 4.消毒 在培养的整个过程中，都需要是一个 无菌环境 5.pH、温度、光照 菊花： pH=5.8 温度控制在18 ~ 22℃ 每日光照12h 二 实验操作 视频录象 二 实验操作 制备MS 固体培养基 外植体消毒 外植体消毒： 流水冲洗—洗衣粉刷洗—流水冲洗—酒精 —无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少 三次之上 二 实验操作 制备MS 固体培养基 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培 外植体消毒： 流水冲洗—洗衣粉刷洗—流水冲洗—酒精 —无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少 三次之上 思考 在整个操作过程中，是如何实现无菌环境的？ 1. 培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2. 外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3. 接种的无菌操作 （酒精、酒精灯 ——灼烧） 4.无菌箱中的培养 5.移栽到消过毒的环境中生存一段时间 例3：根据单倍体育种大致过程回答问题： 1）过程①是把花药分离出来，在无菌条件下放在人工培养基上进行离体培养，该培养基中加入的物质应该有____________。（至少答三种） 答案：大量元素、微量元素、有机物（氨基酸、 蔗糖、维生素等）、水、植物激素等 例3：根据单倍体育种大致过程回答问题： 2）过程②是花药在培养基所提供的特定条件下 发生多次细胞分裂，形成愈伤组织，此过程叫 作________，细胞分裂的方式是__________。 脱分化 有丝分裂 例3：根据单倍体育种大致过程回答问题： 3）过程③是诱导愈伤组织分化出芽和根，最后 长成植株。这一过程叫_____。该植株是_____ 植株，其特点是 ______，生产上没有应用价值。 植株弱小,高度不育 再分化 单倍体 例3：根据单倍体育种大致过程回答问题： 4）若图中提供花药的植株基因型为AaBb，则经过① ~ ⑤处理后的植物中，可稳定遗传的个体占______。 100% *