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1、原理：细胞的全能性和细胞膜的流动性 2、过程： ①去壁（纤维素酶和果胶酶）、 ②诱融（物理离心、振动、电刺激等和化学PEG） ③生壁 ④组培 请思考： 在实际操作中，细胞A、B融合后的一定是杂种细胞吗？ A、B、AA、BB、AB ,须筛选出AB 反馈练习 * * 细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过细胞水平或细胞器水平上的操作，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品的一门综合科学技术。 一、什么叫细胞工程？ 按操作对象分 植物细胞工程 动物细胞工程 专题2 细胞工程 种类 工程目的 操作水平 原理与方法 植物细胞工程和动物细胞工程 细胞整体水平或细胞器水平 细胞生物学和分子生物学 按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物质或获得细胞产品 概念： 前者是细胞水平或细胞器水平上生物技术, 后者是分子水平上的生物技术。 克隆多莉羊技术是 水平上的技术， 培育抗虫棉是 水平上的技术。 细胞工程与基因工程相比： 细胞 分子 思考: 植物细胞工程 植物细胞工程技术常用的技术手段： 植物组织培养和植物体细胞杂交 植物细胞工程理论基础： 植物细胞的全能性 植物细胞工程的基本技术 细胞的全能性 1、定义： 生物体的细胞具有使后代细胞发育成完整个体的潜能的特性。 2、原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因. ?受精卵 生殖细胞 体细胞 ＞ 3、大小： ?植物细胞＞动物细胞 ＞ 注意：受精卵的全能性最高 4、生物体内细胞并没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织器官的原因 基因在特定的时间和空间条件下选择性表达的结果 5、植物细胞表现出全能性的条件： ?离体 ?一定的营养物质、激素（生、细） ?适宜的温度、pH、无菌等外界条件 二、植物组织培养技术： 植物组织培养 植物组织培养技术的流程简图 植物材料 （消毒） 脱分化 无菌接种、诱导 愈伤组织 再分化 诱导 试管苗 移栽到大田,培养成正常植株 决定植物脱分化、再分化的关键因素是什么？ 植物激素的种类和比例(生长素和细胞分裂素） 1、愈伤组织：离体的植物器官、组织或细胞，在培养一段时间以后，通过细胞分裂，形成一种高度液泡化、无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松无规则的组织。 2、植物细胞的脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。 脱分化的实质和结果分别是什么？ 实质是恢复细胞的全能性过程。 结果是形成愈伤组织。 3、植物细胞的再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程中重新分化根或芽等器官的过程。 小结： 植物组织培养的过程 外植体 愈伤组织 根、芽 植物体 脱分化 再分化 光 （离体的,已分化组织或细胞） （未分化） （分化） 条件？ 优点？ 特点？ 繁殖速度快 不受季节限制 工厂化生产 幼苗无毒 保持优良性状 ①适宜温度、 pH和无菌环境。 ②无机物、有机物和植物激素（生长素，细胞分裂素等） 无定形状态 薄壁细胞 高度液泡化 排列疏松、无规则 无叶绿体,不进行光合作用 植物组织培养的概念： 植物组织培养就是在无菌和人工控制条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 三、植物体细胞杂交技术： 因为不同种生物之间存在着生殖隔离，所以用传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。 于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。 这幅番茄—马铃薯图利用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？ “Potamato” 3、具体过程： 杂种植株 融合的原生质体AB 再生出细胞壁 脱分化 愈伤组织 再分化 植物细胞的融合 植物组织培养 植物细胞A 原生质体B 原生质体A 杂种细胞AB 去 壁 去 壁 人 工 诱 导 方法？ 促进融合的方法？ 融合完成的 标志 植物细胞B * *