【创新大课堂】高考生物(人教版)一轮课件xDNA和蛋白质技术与植物有效成分的提取.pptVIP

第四讲 DNA和蛋白质技术与植物 有效成分的提取 [回扣基础] 一、DNA的粗提取与鉴定 1．基本原理 2．操作过程 (1)材料的选取：选用DNA含量 的生物组织 (2)去除杂质：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过控制 去除杂质 (3)DNA析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却后的体积分数为95%的酒精溶液 (4)DNA的鉴定：在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂， 5 min，溶液变成蓝色 二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 1．PCR原理 DNA 原理 2．PCR反应过程 (1) ：当温度上升到 以上时，双链DNA解聚为单链。 (2) ：温度下降到 时，两种 通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。 (3) ：温度上升到72 ℃左右时，溶液中的4种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在 的作用下，根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。 三、血红蛋白的提取和分离 1．血红蛋白的提取和分离原理及方法 (1)原理：蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和 、所带 的性质和多少、溶解度、吸附性质和对其他分子的亲和力等，可以用来分离不同种类的蛋白质。 (2)分离方法 ①凝胶色谱法：也称做 ，是根据 的大小分离蛋白质的有效方法。 ②电泳法：电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。常用的电泳法有 和 。 2．血红蛋白的提取和分离过程 样品处理：红细胞的洗涤→ 的释放→分离血红蛋白溶液 粗分离：用 法除去样品中相对分子质量 的杂质 纯化：用 法分离相对分子质量不同的蛋白质 纯度鉴定：电泳法测定相对分子质量 四、植物有效成分的提取 1．植物芳香油的提取 (1)提取玫瑰精油实验 ①方法： 法。 ②实验流程 (2)提取橘皮精油的实验 ①方法：一般用 法。 ②实验流程 2．胡萝卜素的提取 (1)胡萝卜素性质：不溶于 ，微溶于乙醇，易溶于 等有机溶剂。 (2)实验设计 ①方法：萃取法， 最适宜作萃取剂。 ②实验流程 (3)鉴定方法： 法。 [优化落实] 一、DNA的粗提取与鉴定 1．[判一判] (1)DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，在 0．14 mol/L的NaCl溶液中溶解度最低。 (√) (2)DNA不溶于冷酒精，可用酒精进一步提取DNA。(√) (3)DNA与二苯胺溶液反应生成紫色物质。 (×) 二、多聚酶链式反应扩增DNA片段 2．[判一判] (1)DNA聚合酶只能从3′端延伸子链，因此DNA的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸。 (√) (2)变性过程中高温使DNA变性解旋，该过程不需要解旋酶的作用。 (√) (3)延伸过程用到的酶在高温下失活，因此在PCR扩增时需要再添加。 (×) (4)如果把模板DNA的两条链用15N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃～55℃～72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占25%。 (√) (5)PCR中由碱基错配引起的变异属于基因突变。 (√) 三、血红蛋白的提取和分离 3．[判一判] (1)利用凝胶色谱法分离蛋白质时，相对分子质量小的先洗脱出来。 (×) (2)在电泳过程中，蛋白质分子的移动速度，与分子本身的大小和形状无关，而与所带电荷的差异有关。 (×) (3)在SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳中，电泳迁移速率完全取决于分子的大小。 (√) 四、植物有效成分的提取 4．[判一判] (1)提取玫瑰精油的过程中，油水混合物中要加入氯化钠，使油水混合物发生盐析，从而将玫瑰油和水分开。 (×) (2)从玫瑰花里面提取的芳香油呈淡黄色，并带有甜韵的玫瑰香。 (√) (3)从橘皮里面提