白血病细胞分化新机和凋亡诱导药物的实验研究.doc

白血病细胞分化新机制和凋亡诱导药物的实验研究 目 录 任务来源……………………………………………………………………1 研究目的和意义……………………………………………………………2 国内外研究现状……………………………………………………………4 本研究主要内容…………………………………………………………..12 本研究工作的结果………………………………………………………..18 本研究工作的创新点……………………………………………………..26 作用意义…………………………………………………………………..27 推广应用的范围、条件和前景…………………………………….…….28 存在的问题和改进意见…………………………………………………..29 本项目所涉及的论文目录………………………………………………..30 本项目在2005年度获得： 中华医学一等奖、上海室科技进步一等奖和上海医学一等奖 任务来源 1．上海市科委重点项目（2001-2004年） 项目名称：治疗白血病的药物靶基因的发现和功能研究 负责人：陈国强、赵倩 项目编号：02DJ14008 2. 国家973项目（2002-2007年） 项目名称：利用蛋白质-蛋白质相互作用信息发现治疗白血病的药物靶标 负责人：陈国强、童建华 项目编号：2002CB512805 3. 国家973项目（2002-2007年） 项目名称：利用原创型细胞分化模型发现诱导分化治疗白血病的药物靶标 负责人：赵倩、李稻 项目编号：2002CB512806 4. 国家科技部国际合作重点项目（2003-2006年） 项目名称：诱导白血病细胞分化的核心基因及其成药性的发现和功能研究上海市科委AML1-ETO和HIF-1(相互作用及其在白血病发病中的意义国家自然科学基金低氧诱导因子1α介导白血病细胞分化的分子机制研究二、研究目的和意义 研究目的——问题的提出和发展 恶性肿瘤(包括白血病和实体瘤) 是威胁人类健康的主要杀手，居我国人口死亡原因的第二位。研究其发病机制并发掘新的诊治手段，一直是生物医学研究的重要热点。尽管恶性肿瘤的发病是一个多阶段的、多基因损伤的复杂过程，它的基本细胞学病理变化不外乎是增殖失控、分化受阻和（或）凋亡缺陷等三大方面。因此，肿瘤内科治疗的基本策略也是以这三个基本细胞学事件为基础的。例如，二十世纪40年代末以来，传统的细胞毒化疗主要是针对肿瘤细胞的增殖失控所设计的。由于这些疗法缺乏特异性，在杀伤肿瘤细胞的同时，常常也对正常细胞产生杀伤效应，导致诸如骨髓抑制、消化道反应、脱发、肝肾损害等严重毒副作用，而且即使在机体可能承受的条件下也难以从根本上彻底清除患者体内的肿瘤细胞。此外，许多恶性肿瘤对放疗和化疗都不敏感。因此，在进一步改善传统化、放疗以期提高疗效、减少毒性的同时，肿瘤的治疗亟需全新的革命性的突破。 二十世纪80年代中期，上海在国际上首先成功地应用全反式维甲酸（ATRA）治疗急性早幼粒细胞性白血病（APL）获得成功，并成为当今治疗APL病人的首选策略。这种成功实践不仅为许多APL病人带来了生存希望，更重要的是使肿瘤的诱导分化治疗模式从假设变为现实。但是，迄今诱导分化治疗的实践仅仅限于APL。在APL以外的白血病甚至恶性肿瘤实现突破是肿瘤的诱导分化治疗模式的真正确立所要求的，也是许多肿瘤学家追求的重要目标。 另一方面，和细胞生长和细胞分化一样，细胞死亡细胞凋亡的生物学意义，越来越肿瘤、发育和神经生物学家、免疫学家和其他生物学工作者极大基于细胞凋亡异常在许多人体恶性肿瘤的发病学上占有十分重要的地位，以选择性地诱导肿瘤细胞凋亡为目标的凋亡干预技术可能成为治疗恶性肿瘤的基本策略。APL治疗中获得又一重要突破，即发现三氧化二砷(As2O3)也能够有效治疗APL。体外研究显示，高浓度的As2O3诱导APL细胞凋亡，而低浓度则诱导细胞部分分化。但是，As2O3的体外诱导分化效应不如体内明显。基于这些发现，我们假说，体内某些因素可能影响As2O3的诱导分化效应。我们考虑的因素之一是氧浓度，因为（1）体内末梢组织的氧浓度低于5%，而体外培养细胞处于95%的空气中；（2）有报道显示骨髓白血病细胞和正常细胞氧浓度较低；（3）临床病理研究显示骨髓微血管密度和血清血管内皮生长因子（VEGF）含量与AML病人的预后密切相关。于是，我们开始研究在低氧环境下，As2O3对APL细胞的诱导分化效应。我们惊奇地发现低氧（2%O2）和低氧模拟化合物包括氯化钴（CoC2）和去铁胺（DFO）能够有效诱导APL细胞分化更为重要的是，诱导低氧和低氧模拟化合物（氯化钴、去铁胺）诱导白血病细胞分化α与CEBP/α相互作用并增加其转录活性、AML1-ETO增加HIF-1α表达但抑制低氧诱导的AML细胞分化、PLSCR1的凋亡诱导