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植物分子育种教案 沈法富 目 录 第一编 植物分子标记辅助育种（20学时） 第一章遗传标记概述（3学时） 第一节 遗传标记的发展 第二节 遗传标记的种类 形态标记 细胞学标记 蛋白质标记 DNA标记 第二章 DNA标记技术（3学时） 第一节 DNA杂交的分子标记 RFLP技术 VNTR技术 第二节 PCR技术的分子标记 随机引物的PCR标记 特异引物的PCR标记 第三节 限制性酶切和PCR的分子标记 AFLP标记 CAPS标记 第四节 单核苷酸多态性的DNA标记 第三章 分子图谱的构建（4学时） 第一节 作图群体的建立 第二节 图谱构建的理论基础 第三节 DNA标记分离数据的数学处理 第四节DNA标记图谱的完善 第五节 比较作图 第四章 质量性状的分子标记（3学时） 第一节 近等基因系分析法 第二节 分离体分组混合分析法 第五章 数量性状的分子标记（3学时） 第一节 数量性状基因的初级定位 第二节 数量性状基因的精细定位 第六章 分子标记辅助选择技术（4学时） 第一节 质量性状的标记辅助选择技术 第二节 数量性状的标记辅助选择技术 第三节 标记辅助选择技术的应用研究 第四节 分子标记辅助选择的发展策略 第一编 转基因植物育种（20学时） 转基因育种的基础（4学时） 目的基因的克隆与表达载体的构建 植物遗传转化技术 转基因植物的筛选与鉴定 转基因植物的遗传规律 转基因植物与优质育种（3学时） 改变植物贮藏蛋白的品质 调节碳水化合物的合成 改善植物油脂的品质 改良棉花纤维品质 转基因抗病育种（3学时） 植物抗病基因的克隆 抗植物病毒基因工程 抗真菌植物基因工程 转基因抗虫育种（3学时） Bt毒蛋白基因 其他抗虫基因 植物转基因抗虫研究的进展 转基因抗非生物逆境育种（4学时） 植物耐盐基因工程 耐旱基因工程 抗除草剂基因工程 抗寒冷基因工程 第六章 转基因作物的安全性及其对策（3学时） 转基因作物的潜在风险 转基因作物作为食品的安全性问题 第一章 遗传标记概述 遗传标记是指可以明确反映遗传多态性的生物特征。在经典遗传学中，遗传多态性是指等位基因的变异。在现代遗传学中，遗传多态性是指基因组中任何座位上的相对差异。遗传标记可以帮助人们更好地研究生物的遗传与变异规律。在遗传学研究中遗传标记主要应用于连锁分析、基因定位、遗传作图及基因转移等。在作物育种中通常将与育种目标性状紧密连锁的遗传标记用来对目标性状进行追踪选择。在现代分子育种研究中，遗传标记的应用已成为基因定位和辅助选择的主要手段。纵观遗传学的发展历史，每一种新型遗传标记的发现，都大大推进了遗传学的发展。 第一节 遗传标记的发展 19世纪后半叶，孟德尔（G.Ｊ. Mendel）以豌豆为材料，利用七对外部形态特征差异明显、易于识别的相对性状，对杂种后代的不同个体依性状表现进行归类分析，提出了“遗传因子”假说，并发现了生物遗传的分离规律和独立分配规律，即著名的孟德尔定律。1910年，摩尔根（T.H. Morgan）在哥伦比亚大学的实验室发现一种奇特的果蝇，它的眼色不是野生型的红色而是白色，摩尔根用白眼雄蝇与野生型杂交，发现在F1代中白眼为隐性性状，在F2代中红眼与白眼的遗传符合孟德尔分离规律。但是在按雌雄性别分别记数时发现了异常现象，雌蝇全部为红眼，雄蝇中一半为红眼一半为白眼。由此发现决定眼色的基因与决定性别的基因是连锁遗传的，从而产生了著名的摩尔根遗传学说。果蝇白眼遗传标记的发现成为近代遗传学研究的一个里程碑。1913年，A. H. Sturtevant通过连锁遗传分析成功地在果蝇的X染色体上定位了5个基因，从此确定了遗传学的染色体理论和遗传作图的基本原理。 1910年以后，摩尔根将孟德尔“遗传因子”的行为与染色体的行为结合起来进行研究，证实了“遗传因子”是染色体上占有一定位置的实体，由此导致了细胞遗传学的诞生。通过对不同物种染色体形态、数目和结构的研究，发现各种非整倍体、染色体结构变异以及各种异形染色体等都有其特定的细胞学特征，可以作为一种遗传标记来测定基因所在的染色体及其相对位置，或通过染色体代换等遗传操作进行基因定位。这种能明确显示遗传多态性的细胞学特征，通称为细胞学标记。 1941年，美国遗传学家G. W. Beadle和生化学家E. L. Tatum通过研究红色面包霉的生化突变型，对一系列营养缺陷型进行遗传分析，提出了“一个基因一个酶”的假说，创立了生化遗传学。50年代许多科学家发现同一种酶可具有多种不同的形式。同时由于淀粉凝胶电泳技术的发展和组织化学染色剂的使用，使这种酶的多种形式成为肉眼可辩的带型——酶谱。1959年，C. L. Markert和F. Moller根据对几种动物乳糖脱氢酶的多种形式的研究，提出了用同工