第四章第四节发酵污染及其防治.pptVIP

第三节 发酵污染及其防治 发酵染菌的防治是发酵工厂的重要课题。 一、发酵染菌的分析： 酶制剂对多数细菌几乎无抑制作用。大多数酶的发酵均在中性pH条件下进行，且培养基中还含有大量固体成分，如灭菌不彻底，就会受杂菌的污染。 1、杂菌的判断： 酚红培养基 接种试验 出现变色反应 平板划线分离 营养培养基 出现杂菌且菌型相同 产酶菌代谢生化指标异常 连续三组样品反应为阳性 有杂菌污染 染菌判断步骤： 噬菌体的判断方法示意图： 2%琼脂培养基 1%琼脂培养基 菌悬液 双层平板 噬菌斑 2、我国部分厂家发酵杂菌原因分析 杂菌原因 百分率（%） 外界带入杂菌（取样、不料等带入） 8.20 设备穿孔 7.60 空气系统有菌 26.00 罐压跌零 1.60 接种 11.00 蒸汽压力不够或蒸汽量不足 0.60 管理不足 7.09 操作违反规程 1.60 种子带菌 0.60 原因不明 35.00 3、发酵染菌的分析与防治 ⑴发酵染菌的规模对发酵的影响： 大批量发酵罐染菌 一般是空气系统有问题，或空气系统结构不合理或空气过滤器介质失效 部分发酵罐染菌 前期染菌 —— 可能是种子带菌，或灭菌不彻底： 后期染菌 —— 可能是中间补料（包括补料液带菌或补料 管路渗漏）； 个别发酵罐连续染菌——大多是设备渗漏造成的，应仔 细寻找阀门的渗漏或是罐内清洗、灭菌不 彻底（如搅拌桨背部、罐内焊接疤造成拈 壁现象。 ⑵不同污染时间对发酵的影响 影响：因此时产酶菌还没有大量繁殖，杂菌与产酶菌争夺营养和溶氧，容易使发酵失败。 控制方法：可采用降温培养，调整PH值，调整补料量等予以补救。也可采用补加培养原料，重新进行灭菌后在接种发酵，可收到一定效果。 发酵前期染菌 影响：严重干扰产酶菌的生理代谢，杂菌大量产菌，培养液pH值下降，糖、氮消耗快,发酵液发粘、发臭，无法控制泡沫产生。 控制方法：降低温度、降低通风量或停止搅拌，补少量糖，密切关注代谢变化情况。或补送一部分新鲜菌液或正常的发酵醪液以抑制杂菌繁殖，促进产酶菌转为正常。若发酵罐内酶液单位已达到一定水平，也可提前放罐，发酵罐应彻底灭菌 。 发酵中期染菌 发酵后期染菌 影响与方法：因产酶菌已经占优势，已有相当大的发酵单位， 因此对生产影响不大。但因染菌往往使发酵液过粘从而 滤过困难，影响产量，因此应提前放灌。 发酵污染噬菌体 影响：因噬菌体很易通过发酵罐的排气传播到空气中，进 而 污染其他发酵罐，对生产造成极大的危害。 控制方法：在环境四周喷洒或往下水口倒入甲醛溶液等消 毒对污染的发酵罐放罐前应加热到120℃，灭菌 30min才能排放。放罐后应彻底清洗，并用37%甲 醛溶液浸泡12h， 或其他常用消毒液彻底处理。