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职高养殖专业《畜禽繁殖与改良》 －－家畜精液的稀释与保存 说 课 稿 内容简介： 学习精液稀释液的配制与稀释方法 教学目的： 1、了解稀释液的成分和作用，掌握稀释液的配制和精液稀释的方法 2、掌握常温、低温、冷冻保存精液的原理和方法。 教学重点： 1、稀释液的配制方法和精液稀释 2、冷冻保存精液方法 3、精液的外观性状检查方法 4、精子活力的检查方法 5、精子的密度的检查方法。 教学难点： 1、玻璃化 2、精液稀释 3、牛颗粒冻精的制作方法 4、精子密度和活力检查方法的掌握 一、精液稀释 精液稀释是继采精和精液品质检查后，向精液中添加适合精子体外存活并保持受精能力的液体。 1、精液稀释的目的 （1）扩大精液量，增加一次采精量的可配母畜数。 （2）通过向精液中添加营养物质和保护剂，可延长精子在体外的存活时间。 （3）便于精液保存和运输。 2、稀释液的成分及作用 （1）稀释剂。稀释剂主要用以扩大精液容量，要求所选用的药液必须与精液具有相同的渗透压。严格地讲，凡向精液中添加的稀释液都具有扩大精液容量的作用，均属稀释剂的范畴，但各种物质添加各有其主要作用，一般用来单纯扩大精液量的物质有等渗的氯化钠、葡萄糖、蔗糖溶液等。 （2）营养剂。主要为精子体外代谢提供养分，补充精子消耗的能量。如糖类、奶类、 卵黄等。 （3）保护剂。 A、缓冲物质：精子在体外不断进行代谢，随着代谢产物(乳酸和CO2等)的累积，精液的pH逐渐下降，甚至会发生酸中毒，使精子不可逆地失去活力。因此，有必要向精液中添加一定量的缓冲物质，以平衡酸碱度。常用的缓冲剂有柠檬酸钠、酒石酸钾钠、磷酸二氢钾等。近些年，生产单位采用三羟甲基氨基甲烷(Tris)作为缓冲剂，效果较理想。 B、降低电解质浓度物质： 副性腺中Ca2+、Mg2+ 等强电解质含量较高，刺激精子代谢和运动加快，在自然繁殖中无疑有助于受精，但这些强屯解质又能促进精于早衰、精液保存时间缩短。为此，需向精液中加入非电解质或弱电解质，以降低精液电解质的浓度。常用的非电解质和弱电解质有各种糖类、氨基乙酸等。 C、抗冷物质 在精液保存过程中，常进行降温处理，如温度发生急剧变化，会使精子遭受冷休克而失去活力。发生冷休克的原因使精子内部的缩醛磷脂在低温下冻结凝固，影响精子正常代谢，出现不可逆的变性死亡。因此，在保存的稀释液中加入抗冷物质，使精子免受伤害。常用的抗冷休克物质有卵黄、奶类等。 D．抗冻物质 在精液冷冻保存过程中，精液由液态向固态转化，对精子的危害较大，不使用抗冻剂，冷冻精液就不能成功。一般常用甘油和二甲基亚矾(DMSO)作为抗冻剂。 E．抗菌物质 在采精和精液处理过程中，虽严格遵守操作规程，也难免使精液受到细菌的污染，况且稀释液中含营养物质较丰富，给细菌繁殖提供了较好条件。细菌过度繁殖不但影响精液品质，输精后也会使母畜生殖道感染，造成不孕。常用的抗菌物质有青霉素、链霉素、氨基苯磺胺等。 （4）其他添加剂。 除上述三种成分以外，另向精液中添加的、起某种特殊作用的微量成分都属其他添加剂的范畴。 A、激素类 向精液中添加催产素、前列腺E型等，能促进母畜子宫和输卵管的蠕动，有利于精子运行，提高受胎率。 B、维生素类 某些维生素如B1、B2、B12、C、E等具有改进精子活力，提高受胎率的作用。 C、酶类 过氧化氢酶能分解精液中的过氧化氢，提高精子活力；β—淀粉酶能促进精子获能等.精子获能等。存；加入抗氧化剂、提高精子括力的精氨酸、咖啡因；区分精液种类的染料3、稀释液的种类和配制 （1）稀释液的种类 A、现用稀释液。等渗液：生理盐水、蔗糖 B、低温保存稀释液。加入卵黄抗休克 C、常温保存稀释液。以糖类和弱酸盐为主，pH偏低。 D、冷冻保存稀释液。以卵黄、甘油为主体，具有抗冻的特点。 （2）稀释液的配制 A、稀释液应现用现配，如配制后确需保存，经消毒、密封后放入冰箱中最多能保存2—3d。 B、配制稀释液的器具，用前必须洗净并严格消毒，用稀释液冲洗后才能使用。 C、配制稀释液的蒸馏水要新鲜，最好现用现制。 D、所用药品要纯净，一般使用化学纯制剂。药品称量要准确，经溶解、过滤、消毒后方能使用。 E、卵黄要取自新鲜鸡蛋，抽取时尽量不要混入蛋清，待稀释液消毒冷却后加入。 F、奶粉的颗粒比较大，溶解时先用等量蒸馏水调成浆糊状，然后加蒸馏水至需要量，用脱脂棉过滤后放人90—95C的水浴中消毒lOmin。 4、精液稀释方法与稀释倍数 （1）稀释方法 A、精液稀释应在采精后立即进行。 B、采精后把精液迅速置于30℃的保温瓶中，以防温度的变化。 C、稀释时把精液和稀释液同时放在30℃的水浴锅中。 D、稀释时把稀释液沿着精液容器的壁慢慢加入精液中，边加入边搅拌。 E