SOD生产 --许祥博.pptVIP

SOD的 生产 第六组 制作人：许祥博 一、概述 超氧化物歧化酶Orgotein (Superoxide Dismutase, SOD)，别名肝蛋白、奥谷蛋白，简称：SOD。SOD是一种源于生命体的活性物质，能消除生物体在新陈代谢过程中产生的有害物质。对人体不断地补充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase, EC1.15.1.1, SOD）是1938年Marn等人首次从牛红血球中分离得到超氧化物歧化酶开始算起，人们对SOD的研究己有七十多年的历史。1969年McCord等重新发现这种蛋白，并且发现了它们的生物活性，弄清了它催化过氧阴离子发生歧化反应的性质，所以正式将其命名为超氧化物歧化酶。 二、SOD的作用 世界各国对“超氧化物歧化酶”的作用认定： 美国注册专利号为（CN1152337A）：用于预防和治疗大脑局部出血、溃疡、消除炎症、心率失常、浮肿、中毒、风湿、类风湿、风湿性关节炎、放射性损伤、药物中毒等症。 法国注册专利号为（CN1167441A）：用于预防和治疗特异性脑损伤、非特异性脑损伤而引起的脑功能识别障碍。 欧洲注册专利号为（499621）：用于预防和治疗癌症及术后放、化疗带来的脑损伤，抑制癌细胞再形成或扩散。 日本注册专利号为（4327541，4312533）：用于治疗器官移植后的抗免疫反应具有奇效。用于治疗大脑局部出血导致神经坏死，防止半身不遂的治疗药物。 台北医院用“超氧化物歧化酶（SOD）”治疗烧伤、烫伤、比较实验获得成功，报道说：用“超氧化物歧化酶（SOD）”涂抹患处愈合是常规疗法的3倍，而且疤痕明显减轻。 美国休斯顿得克萨斯大学的安德森，癌症中心的华人博士黄鹏和他的同事们发现超氧化物歧化酶（SOD）可以选择性地杀灭白血病细胞，而不损害正常组织细胞。 三、应用领域 1.药物类 主要集中在炎症病患者，尤其治疗类风湿关节炎、慢性多发性关节炎、心肌梗塞、心血管病、肿瘤患者以及放射性治疗炎症病患者； 2.生化制药 作为一种生化酶制剂，广泛应用于临床和科研上，可抗衰老，抗肿瘤、调节人体内分泌系统； 四、操作流程图 秤取→研磨→离心→取上清液→去除杂蛋白→SOD酶的沉淀分离→离心→检测 五、SOD的生产 1.SOD酶的提取 称取5克大蒜蒜瓣，加入石英砂研磨破碎细胞后， 加入pH7.8,0.05mol/L的磷酸缓冲液（pH7.8）15ml，继 续研磨20min,使SOD酶充分溶解到缓冲液中，然后 6000r/min冰冻离心15min，放弃沉淀，取上清液。 2.去除杂蛋白 上清液中加入0.25倍体积的氯仿——乙醇混合液搅 拌15min,6000r/min离心15min，放弃沉淀，得到的上清 液即是粗酶液 3.SOD酶的沉淀分离 粗酶液在搅拌下缓慢加入固体硫酸铵至饱和浓度60%， 持续搅拌15min，6000r/min离心15min，得到SOD酶沉淀 4.将沉淀溶入pH7.8，0.05mol/L的磷酸缓冲液5mL中，然 后6000r/min离心15min，放弃沉淀，取上清液，用凝胶 sephacylS-200进行纯化，然后超滤浓缩。 5.用紫外分光光度计测定浓液的蛋白含量 6.将浓缩冷冻干燥后即得成品。 六、注意事项 1在破碎细胞时要注意安全，一定要破碎的彻底 2 PH的控制力度很重要，以及在实验中的温度 等 3分光光度计的各项操作注意事项